細胞簡介 ：

小鼠腦動脈血管內皮分離自腦動脈組織 ；腦動脈有成對的頸內動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環 ；靜脈係多不與同名動脈拌行 ，所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內靜脈 ；各級靜脈都沒有瓣膜，它包括腦的動脈係統和腦的靜脈係統 。腦動脈血管內皮細胞主要功能 ：①維持血管內外的動態平衡 ；②合成和分泌細胞因子和介質 ；③維持凝血和纖溶的動態平衡 。

方法簡介 ：

見說明

質量檢測

本公司生產的小鼠腦動脈血管內皮采用膠原酶-混合消化法並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10^5cells/瓶 ；經CD31/vWF免疫熒光鑒定，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

M199 、FBS 、內皮細胞生長添加劑 、Heparin、Ascorbic Acid 、Hydrocortisone 、Penicillin 、Streptomycin等

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

溴甲酚紫   5g

BromocresolPurple,FreeAcid   25g

溴酚蘭   10g

BromophenolBlue   50g

小鼠乙型肝e抗原(HBeAg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 30 ligand (sCD30L) ELISA Kit 人可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒

Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 人烏頭酸酶2(ACO-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor5-(Mouse5-Nucleotidase)ELISAKit小鼠5核苷酸酶

飲料L-乳酸比色法定量試劑盒20次

MouseMacrophage-DerivedChemokine,MDCELISAKit小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒規格 ：96T/48T

HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein

Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)

TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein

NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白

CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein

小鼠腦動脈血管內皮細胞大鼠肝細胞生長因子激活物(HGFA)試劑盒  ，英文名 ： HGFA ELISA Kit

Porcine leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 豬白血病抑製因子受體(LIFR)試劑盒

蠟樣芽孢杆菌(BC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMDA(Humanmalondialchehyche)ELISAKit人二

體液人類巨細胞病毒蛋白酶(HCMVPROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次

ELISAKitE2牛雌二醇

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。