細胞簡介 ：

小鼠肝動脈內皮分離自肝動脈組織 ；在胚胎期 ，肝髒有3條動脈供血 ，分別來源於胃左動脈 、腹腔動脈和腸係膜上動脈 ，這3條動脈分別的不同部位 。出生後 ，一般保留一條動脈 ，大部分為起源於腹腔動脈的動脈 ，由其分出左 、右肝動脈供應左 、右半肝 。偶爾也可見起源於胃左動脈的動脈或起源於腸係膜上動脈的動脈 。但也有2條動脈並存的情況 ，如起源於腹腔動脈和起源於胃左動脈（25%） ，起源於腹腔動脈和起源於腸係臘上動脈（10%） ，而起源於胃左動脈和起源於腸係膜上動脈的2條動脈同時存在的情況比較少見 。此外 ，還有5%像胚胎期一樣 ，3條動脈同時存在。這種起源於腹腔動脈以外的肝動脈稱為迷走肝動脈 ，如果肝髒沒有起源於腹腔動脈的動脈供血時 ，此種異位起源的肝動脈稱替代動脈 ，如果在常見肝動脈類型外 ，還有一支這種異位起始的動脈的一部分血流 ，這種肝動脈稱副肝動脈 。肝動脈內皮細胞是襯於肝動脈內表麵的單層扁平上皮 ，在炎症時高表達黏附分子 ，與血流中白細胞表麵黏附分子相互作用 ，從而介導白細胞穿越血管壁 ，亦屬一類非專職抗原提呈細胞 。它們吞噬異物 、細菌 、壞死和衰老的組織 ，還參與集體免疫活動 ，包括 ：①血管收縮及血管舒張 ，從而控製血壓 ；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化 ；④血管生成 ；⑤炎症及腫脹（浮腫） ；⑥內皮細胞亦控製一些物質 ，如白血球進出血管 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠肝動脈內皮采用混合酶消化法結合差速貼壁法 ，並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠肝動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)檢測試劑盒  ，英文名 ： TNFα ELISA Kit

Mouse soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測試劑盒

MouseErythropoietin,EPOELISAKit 小鼠紅細胞生成素(EPO)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanImmunoglobulinA,IgAELISAKitA

微型RNA(miRNA)文庫構建技術試劑盒5次

ELISAKitMT大鼠金屬硫蛋白

F3重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein

ER-alpha 雌激素受體alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受體alpha

IGFBP6重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽)

CEACAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白

ER-alpha 雌激素受體alpha 0.5mgER-alpha 雌激素受體alpha

CSF1R Protein Human 重組人 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 蛋白 (aa 543-922, His & GST 標簽)

F3重組大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 Protein

CEACAM1 Protein Mouse 重組小鼠 CEACAM1 / CD66a 蛋白

IGFBP6重組人 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 Protein

小鼠葡萄糖氧化酶(GOD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 大鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測試劑盒

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCPELISAKit 人抗環胍肽抗體(CCP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HeneggImmunoglobulinofYolk,IgY檢測試劑盒雞卵黃免疫球蛋白(IgY)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

真菌/酵母細胞細胞壁分離試劑盒20次

mouseBeta-Endorphin,β-EPELISAKit小鼠β內啡肽(β-EP)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠肝動脈內皮細胞小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠透明質酸(HA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。