老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长

。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：兔骨外膜细胞

英文名称：Rabbit Periosesteum Cells

组织来源：骨

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔骨外膜分离自骨外膜组织；骨外膜是指成骨细胞与破骨细胞紧贴骨密质外面包着的那层膜
；在骨外膜和骨内膜中含有一种能够生成骨的细胞，称为成骨细胞
，这种细胞具有使骨骼生长的功能
。在骨外膜中还有另外一种专门破坏骨细胞的细胞，称为破骨细胞。这两种细胞作用相反又相互依据。成骨细胞像建筑工人
，不停地生成新的骨组织
，破骨细胞则像维修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨结构
，并且还负责拆除“违章建筑"，就是除去不需要的多余的骨组织，从而使骨的整体结构更符合生物力学的需要
。正常情况下，两种细胞之间处于动态的平衡之中，完成骨的生长发育的新陈代谢
。骨折之后，成骨细胞先启动
，从而促使新骨痂的生成
，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢复了骨的连续性

，往往不符合生物力学的需要
，改建塑形的过程则必须有破骨细胞的参与才能完成

。

实验室分离的兔骨外膜采用胶原酶消化法制备而来

，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔骨外膜经Vimentin免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性
：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

兔骨外膜体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)检测试剂盒 ，英文名： ACTH ELISA Kit

Mouse 16 alpha hydroxy esone 1 (16- a OHE-1) ELISA Kit 小鼠16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)检测试剂盒

ELISA 小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(mouse BMP-R2)  进口分装

CLIAKitforLIFRELISAKit大鼠白血病抑制因子受体

通用型ECL免疫印迹化学发光溶液A液：50毫升B液
：50毫升1000cm2

ELISAKit1,3-βDglucosidase鸡1,3-βD葡葡糖苷酶

FSTL1重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

CGB5重组人 CGB5 蛋白 Protein

IFNG Protein Human 重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

EGF Protein Canine 重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone Related Protein (PTHrP)

IFNG Protein Human 重组人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白

FSTL1重组小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 标签) Protein

EGF Protein Canine 重组狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白

CGB5重组人 CGB5 蛋白 Protein

小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD glucosidase)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human gasic inhibitory polypeptide (GIP) ELISA Kit 人胃抑素(GIP)检测试剂盒

Humancomplexedprostatespecificaigen,cPSAELISAKit 人复合前列腺特异性抗原(CPSA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanC-ReactiveProtein,CRP检测试剂盒人C反应蛋白(CRP)检测试剂盒规格：96T/48T

组织CSK激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanProtamine1,PRM1ELISAKit人1(PRM1)检测试剂盒规格：96T/48T

兔骨外膜细胞糖元染液   Pap stain (exfoliated cell staining)

苏木素染液   Fast HE tissues and exfoliated cells of dye

伊红染液   Gram stain

H-E染液   Acid fast stain

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用