老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中

，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：兔肠黏膜上皮细胞

英文名称：Rabbit Intestinal Mucosal Epithelial Cells

组织来源
：肠

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔肠黏膜上皮分离自肠道组织

；肠道指的是从胃幽门至门的消化管
。肠是消化管中长的一段，也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠、大肠和直肠3大段
。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的
，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便
，再通过直肠经门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化
、吸收食物，以提供足够的养分
，其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的道防线。因此

，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用

，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。

实验室分离的兔肠黏膜上皮采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肠黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

包被条件：鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基：含FBS、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：上皮细胞样

传代特性
：可传1-2代

消化液：0.25%

培养条件

：气相：空气，95%
；CO2，5%

兔肠黏膜上皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态：

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长

。

大鼠乙酰羧化酶α(ACACα)检测试剂盒 
，英文名： ACACα ELISA Kit

Mouse Annexin V (ANX- V) ELISA Kit 小鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)检测试剂盒

MouseStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAkit 小鼠干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumandermato-poin,DPTELISAKit人皮肤蛋白

细胞Akt2/PKBβ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKiANKL大鼠核因子κB受体活化因子配基

IGFBP4重组小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

CK19 细胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 细胞角蛋白19抗原

IDH1重组人 IDH1 蛋白 Protein

HIST2H2BE Protein Human 重组人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

S100A6 Protein Mouse 重组小鼠 S100A6 蛋白

CK19 细胞角蛋白19抗原 0.5mgCK19 细胞角蛋白19抗原

HIST2H2BE Protein Human 重组人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白

IGFBP4重组小鼠 IGFBP4 蛋白 Protein

S100A6 Protein Mouse 重组小鼠 S100A6 蛋白

IDH1重组人 IDH1 蛋白 Protein

小鼠N-乙酰基-丝酰-天门冬酰-赖酰-脯酸(AcSDKP)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat glycogen phosphorylase isoenzyme MM (GP-MM) ELISA Kit 大鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)检测试剂盒

Humaestoterone,TELISAKit 人睾酮(T)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancoagulationfactorⅫ,FⅫ检测试剂盒人Ⅻ(FⅫ)检测试剂盒规格
：96T/48T

组化染色操作20样本

Humaelaxin,RLNELISAKit人松弛肽/松弛素(RLN)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔肠黏膜上皮细胞兔内皮抑素(rabbit ES)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔内啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用