老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养

，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：人外周血树突状细胞(DC细胞)

英文名称
：详见说明书

组织来源
：外周血

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人外周血DC分离自外周血
，由外周血单核细胞诱导而成的；外周血是除骨髓之外的血液
，临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中，再在从血液中提取分离得到造血干细胞，老哥俱乐部把这样得到的干细胞称为外周血干细胞，在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念
。DC细胞
，全称树突状细胞(DC)，是近年来倍受们关注的专职抗原呈递细胞(APC)
，能摄取
、加工及呈递抗原，启动T细胞介导的免疫反应。由美国学者Steinman于1973年在淋巴结中发现，从脾脏中分离出一类与粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞形态和功都不同的白细胞，因其细胞膜向外伸出，形成与神经细胞轴突相似的膜性树状突起，故而命名为树突状细胞。未成熟DC具有较强的迁移能力
，成熟DC能有效激活初始型T细胞
，处于启动、调控
、并维持免疫应答的中心环节
。

公司实验室分离的人外周血DC采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞
、培养过程添加细胞因子诱导而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人外周血树突状(DC细胞)经CD86免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 半贴半悬浮

细胞形态 树突状

传代特性 属于高度分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气
，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液

，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠棕榈酰化膜蛋白2(MPP2)检测试剂盒
，英文名： MPP2 ELISA Kit

Ma beta amyloid (A beta 1-40 1-40) ELISA Kit 马β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)检测试剂盒

Mousesolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit 小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanLinkerforactivationofTcell,LATELISAKit人T细胞活化连接蛋白

土壤细菌DNA分离试剂盒50次

ELISAKitAECA大鼠抗内皮细胞抗体

EDA2R重组小鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 标签) Protein

发动蛋白2(DNM2)重组蛋白 Recombinant Dynamin 2 (DNM2)

GADD45G重组人 GADD45G / CR6 蛋白 Protein

IL17F Protein Human 重组人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

IL23R Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 蛋白 (Fc 标签)

Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)重组蛋白 Recombinant Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)

IL17F Protein Human 重组人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

PRDX1重组小鼠 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein

IL21R Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

C10ORF54重组人 B7-H5 / Gi24 / VISTA 蛋白 Protein

豚鼠内皮素1(EDN1)检测试剂盒 ，英文名： EDN1 ELISA Kit

Human parathyroid hormone related peptide (PTHrp) ELISA Kit 人副甲状旁腺激素相关肽(PTHrp)检测试剂盒

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit 兔子免疫球蛋白A(IgA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBALP(Humanbonealkalinephosphatase)ELISAKit人骨碱性0酸酶

线虫β-半乳糖苷酶化学发光定量检测试剂盒20次

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit兔子Ⅱ(FⅡ)检测试剂盒规格：96T/48T

人外周血树突状细胞(DC细胞)山羊白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

山羊白介素2(IL-2)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

山羊白介素10(IL-10)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

山羊γ干扰素(IFN-γ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行

。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用