老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养

，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：人脐带血间充质干细胞

英文名称
：Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells

组织来源
：脐带血

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

人脐带血间充质干分离自脐带血；脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液
。近十几年的研究发现，脐带血中含有可以重建造血和免疫系统的造血干细胞
，可用于造血干细胞移植；因此，脐带血已成为造血干细胞的重要来源。脐带血中含有大量的干细胞
，干细胞是生命的种子，它会分化成机体的各种细胞

，结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等
。干细胞是具有自我更新
、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体；这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量，又可进一步分化为各种组织细胞，从而在组织修复等方面发挥积极作用
。间充质干细胞（MSC）是一种具有高度自我更新和多向分化潜能的干细胞。在不同的诱导条件下，可分化为多种造血细胞以外的组织细胞
，并具有造血支持、免疫调节
、组织修复等作用
；目前

，多用于风湿免疫疾病的治疗。间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞，存在于骨髓、脂肪组织、脐血及多种胎儿组织。它可分泌多种细胞因子及生长因子，促进造血干细胞（HSC）的增殖与分化。MSCs还具有免疫调节
、抗炎和组织修复作用，可减轻移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相关并发症。

公司实验室分离的人脐带血间充质干采用密度梯度离心法
、差速贴壁法结合培养基筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人脐带血间充质干经CD29
、CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2
，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散

，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠内脂素(VF)检测试剂盒 
，英文名
： VF ELISA Kit

Monkey ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 猴α干扰素(IFN-α)检测试剂盒

RatcoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 大鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGlycoproteinVI(Human)ELISAKit人糖蛋白VI

细胞非蛋白/游离巯基含量比色法定量检测试剂盒20次

RatSomalcellderivedfactor1β,SDF-1βELISAKit大鼠基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)检测试剂盒规格
：96T/48T

MME重组大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原

PRDX2重组人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein

IgG2 Protein Human 重组人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)

CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 标签)

DRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase 0.5mgDRADA/ADAR1(Double-stranded RNA-specific adenosine deaminase) 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗原

IgG2 Protein Human 重组人 IgG2-Fc 蛋白 (257 Ser/Ala)

MME重组大鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 Protein

CD36 Protein Mouse 重组小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 (His & Fc 标签)

PRDX2重组人 Peroxiredoxin 2 / PRDX2 蛋白 Protein

豚鼠胰岛素样生长因子1(IGF1)检测试剂盒 ，英文名
： IGF1 ELISA Kit

Human Mycoplasma pneumoniae aibody (MP-Ab) ELISA Kit 人肺支原体抗体(MP-Ab)检测试剂盒

rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBcl-2(MouseB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKIT小鼠B细胞淋巴瘤因子2

纤维蛋白溶酶(PLASMIN)活性荧光定量检测试剂盒20次

rabbitCoicosterone,COELISAKit兔子皮质同/肾上腺同(CO)检测试剂盒规格
：96T/48T

人脐带血间充质干细胞树突状细胞相关C型凝集素-1   英文名称

：   Human Dendritic cell Associated C type Lectin 1   规格：      英文缩写：   Dectin 1

二氢二醇脱氢酶   英文名称

：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   规格：      英文缩写：   DDH2

多巴胺   英文名称：   Human Dopamine   规格：      英文缩写：   DPN

强啡肽   英文名称：   Human Dynorphin   规格：      英文缩写
：   DYN

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用