老哥俱乐部

细胞简介：

鸡卵泡基膜分离自鸡卵泡组织
；成熟卵泡是卵巢的组织结构成分之一，卵泡腔很大，卵丘很明显
。卵泡内膜细胞紧靠卵泡颗粒层，与颗粒层细胞之间有一层基膜相隔，内膜细胞呈多边形，胞质清亮，胞核圆形
，细胞间可见许多毛细血管，外膜细胞位于外层，多呈梭形，与周围结缔组织分界不明显。卵泡（follicle）中卵母细胞四周有一层菱形或扁平细胞围绕，在卵泡开始发育、卵细胞成长的同时，周围的菱形细胞变为立方形
，并由单层增生成复层，因其细胞浆内含有颗粒
，故称为颗粒细胞。初级卵泡的颗粒细胞为单层；次级卵泡的颗粒细胞增至复层
；成熟卵泡的颗粒细胞展开又变为单层。颗粒细胞的胞核大而圆
，着色深，细胞的游离面有许多细长突起伸入放射带的凹陷部。

方法简介：

公司实验室分离的鸡卵泡基膜采用先机械分离后胶原酶反复消化法、并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的鸡卵泡基膜经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌
、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS


、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气
，95%
；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次


，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠载脂蛋白H(APOH)检测试剂盒 ，英文名
： APOH ELISA Kit

Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴细胞因子检测试剂盒

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8

细胞/组织白蛋白载玻片制备试剂盒20次

ELISAKitTIMP-2大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2

EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

甲状旁腺激素(PTH)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

CPLX3重组人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

IL1B Protein Canine 重组狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

甲状旁腺激素(PTH)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)

EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白

EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein

IL1B Protein Canine 重组狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白

CPLX3重组人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein

小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cailage glycoprotein 39 (HC gp-39) ELISA Kit 人软骨糖蛋白39(HC gp-39)检测试剂盒

Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG检测试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgG(ai-CMVIgG)检测试剂盒规格：96T/48T

植物基因组DNA化试剂盒(低多糖/酚)50次

Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISAKit人α1抗(α1-AT)检测试剂盒规格
：96T/48T

鸡卵泡基膜细胞小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠单胺氧化酶A（MAOA）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠大内皮素(BigET)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠催乳素(PRL)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况

，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿

。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。