細胞簡介 ：

雞滑膜分離自滑膜組織 ；滑膜組織是位於關節腔內麵的內襯結構 ，各種關節內疾病均會累及滑膜 。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構 ，同時在各種關節疾患中也是主要病變部位 。骨關節炎（OA）以關節軟骨退行性變為特征 ，其病理改變累及關節的各個組成部分 ，但絕不僅局限於軟骨 ，還包括軟骨下骨 、滑膜 、半月板和韌帶 。各組成部分的病理改變相互影響 ，相互作用 ，共同加速關節的退變 。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體 ，是維持關節正常功能的重要組織結構 ，它包埋在顆粒狀無定性的基質中 ，基質內有分散的纖維分布 。滑膜由A型（巨噬樣滑膜細胞） 、B型（成纖維樣滑膜細胞）以及C型（樹突細胞樣滑膜細胞）細胞組成 。滑膜細胞主要功能 ：①滑膜細胞產生潤滑液成分 ，並且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關 ；②滑膜細胞增生 ，表現為不依賴於支持物生長 ，並且分泌大量的效應分子來促進炎症和關節損壞 ；③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分 。

方法簡介 ：

實驗室分離的雞滑膜采用混合酶消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的雞滑膜經Vimentin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 ：含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳3代左右

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

雞滑膜體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠粘蛋白1(MUC1)檢測試劑盒  ，英文名 ： MUC1 ELISA Kit

Mouse lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)檢測試劑盒

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAkit 小鼠白介素1α(IL-1α)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit人胰高血糖素樣肽1

吸煙者人體肺組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

ELISAKitSDF-1β/CXCL12大鼠基質細胞衍生因子1β

CXCL13重組狗 CXCL13 / BCA-1 蛋白 Protein

N-ras 原癌基因抗原 0.5mgN-ras 原癌基因抗原

NTRK1重組人 TrkA / NTRK1 蛋白 (aa 194-413, His 標簽) Protein

EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白

FAM3D Protein Mouse 重組小鼠 FAM3D / Oit1 蛋白 (Fc 標簽)

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注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。