細胞簡介 ：

大鼠主動脈內皮分離自主動脈組織 ；主動脈是體循環的動脈主幹 。其運行路徑為 ：升主動脈起於左心室 ，至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓，弓行向左後至第4胸椎體下緣移行為降主動脈 ；在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈 ，以上為胸主動脈 ，至第4腰椎體下緣分為左 、右髂總動脈 ；髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內 、外動脈 。主動脈內皮細胞是覆蓋在主動脈內麵的單層細胞 ，可分泌一係列血管活性物質而保持血管穩態 ，當其受到炎症或其它因素刺激後穩態被破壞而導致一些心血管疾病的發生 。因此 ，主動脈內皮細胞已成為研究心血管疾病發病機製及治療藥物缺少的工具 。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞 ，由一層扁平細胞所組成 。它形成血管的內壁 ，是血管管腔內血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口 。內皮細胞是沿著整個循環係統 ，由心髒直至小的微血管 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的大鼠主動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法 、並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠主動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

小鼠CD3分子(CD3)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)ELISAKit   ELISA. 

小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISAKit   ELISA.

小鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA 試劑盒

Human eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 人嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)試劑盒

HumandopamineD2receptor,D2RELISAKit 人多巴胺D2受體(D2R)試劑盒 進口分裝

Humanai-thrombieceptor,A試劑盒人抗受體(A)試劑盒

植物線粒體核糖體分離試劑盒10次

HumanichinellaaibodyELISAKit人旋毛蟲抗體(ichinellaAb)試劑盒

FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽) Protein

ADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 0.5mgADAMTS-7(a disintegrin-like and metalloprotease-7 ) 新型金屬基質蛋白酶(抗原)

SULT1A3重組人 SULT1A3 蛋白 (His 標簽) Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽)

CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 標簽)

雌激素受體β(ERβ)重組蛋白 Recombinant Estrogen Receptor Beta (ERb)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標簽)

FCGRT & B2M重組小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白

EPHA2重組人 EphA2 蛋白 (His 標簽) Protein

大鼠主動脈內皮細胞大鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)試劑盒  ，英文名 ： MUC5AC ELISA Kit

Mouse granulocyte macrophage colony stimulating factor (GM-CSF) ELISA Kit 小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)試劑盒

MouseIerleukin17,IL-17ELISAKit 小鼠白介素17(IL-17)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanGlucagon,GCELISAKit人胰高血糖素

物理法石蠟切片鬆動組織抗原修複處理試劑盒50次

ELISAKitAFP大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。