產品名稱 :大鼠眼動脈平滑肌細胞
產品特點 :大鼠眼動脈平滑肌細胞公司正在出售的產品EPC, 大鼠血管內皮祖細胞 Rattus Li-7 人肝癌細胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC MDA-MB-415人腺癌細胞 MDA-MB-415 human breast adenocarcinoma cells L-15培養基+15%FBS 人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)
產品型號 :
更新日期 :2024-12-11
訪問次數 :22
大鼠眼動脈平滑肌細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
眼動脈是眼眶及內容物主要的血液供應 ,是頸內動脈主要分枝 ,也是交通顱內外血管的重要通道 。有研究結果認為 ,絕大多數眼動脈起源於ICA剛出海綿竇處 ,且多數起源於ICA床突上段內上壁 ,少數起源於上壁 ,少數眼動脈可起源於ICA海綿竇段及腦膜中動脈 。眼動脈的走行分為顱內段 、管內段及眶內段 ,眼動脈在管內段一般行走於視神經上方 ,顱內段和眶內段再分為五段 :1 、短臂 ;2 、A角 ;3 、長臂 ;4 、B角 ;5 、遠側部 。眼動脈進入眶內後沿視神經向下外側走行 ,終止於眶孔的上內側角 。眼動脈的分枝一般分為眼組 、眶組及眶外組 。眼組分為視網膜中央動脈睫前動脈及眼球的脈絡叢 ;眶組分為淚腺動脈和肌動脈 ;眶外組分為篩後動脈 、篩前動脈 、眶上動脈 、瞼內側動脈 、鼻背動脈(終末枝) 。眼動脈平滑肌細胞原代分離培養3天後 ,可見細胞貼壁伸展 ,細胞形態大小不一 ,呈梭形 、不規則形 、三角形或扇形 ,核卵圓形 、居中 ;2周後細胞匯合 ,多數細胞伸展呈長梭形 ,胞漿豐富 ,有分枝狀突起 ,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長 ,高低起伏 ;細胞密度低時 ,常交織成網狀 ;密度高時 ,則排列為旋渦狀或柵欄狀 。傳代後細胞生長較快 ,4-6天即可匯合 ,並保持上述形態學特征和生長特點 。眼動脈供應整個眼球 、眼球附屬器及部分附近組織的營養 。眼動脈可發生痙攣 、血栓 、栓塞及出血等 ,均可嚴重影響視力 。頸內動脈眼動脈瘤簡稱眼動脈瘤 ,又稱床突旁動脈瘤或頸內動脈腹側動脈瘤 。眼動脈瘤是位於眼動脈和後交通動脈之間的動脈瘤 ,占全部顱內動脈瘤的0.47%~9.26% ,30%~70%患者表現為SAH ,1/3有視功能損傷 ,如視力減退 、視野缺損和視神經等 。體外培養的眼動脈平滑肌細胞對於研究其生理功能 、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義 。
產品名稱 | 大鼠眼動脈平滑肌細胞 | 組織來源 | 眼動脈 |
英文名稱 | Rat Ophthalmic Artery Smooth Muscle Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法製備而來 ,細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。
質量檢測
實驗室分離的大鼠眼動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 :
培養基 :基礎培養基 ,含FBS 、EGF 、bFGF 、Insulin 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性 :可傳3代左右
消化液 :0.25%
培養條件 :氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
大鼠眼動脈平滑肌體外培養周期有限 ;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ,以此保證該細胞的佳培養狀態。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
小鼠降鈣素(CT)ELISA 試劑盒
Pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 人色素上皮衍生因子(PEDF)檢測試劑盒
HumangranulysinELISAKit 人顆粒溶素(granulysin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-doublesandedDNA,dsDNA檢測試劑盒人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)檢測試劑盒規格 :96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質敏感(DTNB)比色法定量檢測試劑盒20次
HumanXC-chemokinereceptor1,XCR1ELISAKit人XC趨化因子受體1(XCR1)檢測試劑盒規格 :96T/48T
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NT-3 神經生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經生長因子-3(抗原)
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標簽)
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
NT-3 神經生長因子-3(抗原 0.5mgNT-3 神經生長因子-3(抗原)
CD81 Protein Human 重組人 CD81 / TAPA-1 蛋白 (Fc 標簽)
IL12B重組絨猴 IL12B / IL-12B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ANGPTL4 Protein Mouse 重組小鼠 ANGPTL4 蛋白
ACVR2A重組人 ACVR2 / ACTRII / ACVR2A 蛋白 Protein
小鼠心肽(ANP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Gao Min rat thyroxine (u-T4) ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素(u-T4)檢測試劑盒
HumanHyaluronidase,HAaseELISAKit 人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenAvianLeukosisVirusAG,ALV-AG檢測試劑盒雞白血病病毒抗原(ALV-AG)檢測試劑盒規格 :96T/48T
載玻片細胞BAX蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MousehighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒規格 :96T/48T
大鼠眼動脈平滑肌細胞小鼠血管抑素(mouse Angiosestatin) 作用 : ELISA 規格 : 進口分裝
小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) 作用 : ELISA 規格 : 進口分裝
小鼠B淋巴細胞刺激因子(mouse BAFF) 作用 : ELISA 規格 : 進口分裝
小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 作用 : ELISA 規格 : 進口分裝
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