老哥俱乐部

细胞简介：

大鼠小脑颗粒分离自小脑皮层组织；神经元是神经系统基本的结构与功能单位，小脑颗粒神经元是体积较小的神经元
，直径约10μm，在中枢神经系统中含量非常丰富，近乎神经元数量的一半


。由于小脑神经元的生长、分化和大脑皮层神经元相似
，而且数量多、便于取材

，因此小脑颗粒神经元是研究神经元生长发育、神经轴突再生及神经疾病发生机制和临床神经药理的重要手段
。小脑颗粒神经元是小脑主要的中间神经元
，在哺乳动物的小脑内数量为丰富。颗粒神经元的轴突与苔状纤维和爬行纤维相联系
，形成小脑皮层内的神经元环路
，在小脑的神经活动中起着非常重要的作用。在动物传染性海绵状脑病中
，病变可波及小脑颗粒神经元，导致小脑皮层的神经元环路受损，从而呈现神经性行为失调。研究小脑颗粒神经元在动物传染性海绵状脑病病理学变化中的反应
、病理发生的机理特别是分子机理
，有赖于小脑颗粒神经元细胞模型的建立。小脑颗粒细胞的轴突是沿冠状轴分布的平行纤维，正是这种排列保证了兴奋的单向传导
，这是小脑功能理论中的关键假设
，小脑颗粒细胞通过g-氨基丁酸接受戈尔吉细胞的抑制性突触的信息传入。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠小脑颗粒采用消化法结合神经元专用培养基、化学试剂抑制法筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶

。

质量检测

公司实验室分离的大鼠小脑颗粒经NSE免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1

、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含B-27、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞
；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2，5%

实验报告：

一


、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置

；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后
，吸出培养基

，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4

、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

大鼠血管非性蛋白1(VNN1)检测试剂盒 
，英文名


： VNN1 ELISA Kit

Plas of 25 hydroxy vitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA kit E 植物25羟基3(25(OH)检测试剂盒D3/25 HVD3)检测试剂盒E

MousePlateletFactor4,PF-4ELISAKit 小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanapelin12,AP12ELISAKit人apelin12

细胞ERK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-2/CCL8大鼠单核细胞趋化蛋白2

IgG3重组小鼠 IgG3-Fc 蛋白 Protein

表面活性物质关联蛋白J(SPJ)重组蛋白 Recombinant Surfactant Associated Protein J (SPJ)

CARHSP1重组人 CARHSP1 蛋白 Protein

CD46 Protein Human 重组人 CD46 蛋白

EDAR Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 EDAR 蛋白

Akt/PKC(Protein Kinase C,PKC 0.5mgAkt/PKC(Protein Kinase C,PKC) 蛋白激酶C(多肽抗原)

CD46 Protein Human 重组人 CD46 蛋白

FCGR3重组小鼠 CD16 / FCGR3 蛋白 Protein

CD79B Protein Rat 重组大鼠 CD79B / B29 蛋白 (Fc 标签)

CD1B重组人 CD1B / CD1A 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human kaliuretic peptide (KP) ELISA Kit 人利尿肽(KP)检测试剂盒

HumanAcrineOrange,AOELISAKit 人橙(AO)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

bullfroggrowthhormone,GH检测试剂盒牛蛙生长激素(GH)检测试剂盒规格
：96T/48T

鱼类受精卵细胞冻存试剂盒(超低温)50次

MouseInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠小脑颗粒细胞小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，

，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1

：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。