細胞簡介 ：

大鼠尾動脈內皮分離自尾動脈組織 ；尾動脈是鼠尾的主要血管 ，尾部主要大血管分布表淺 ，尾側靜脈適於注射給藥 ，尾正中動脈適於動脈采血 、練習顯微外科血管吻合技術等，實際應用相當普遍 。許多動物模型也使用鼠尾 。鼠尾部血管豐富 ，供血來源於薦中動脈和臀上動脈兩個動脈 ，形成尾椎節段性分布和縱向貫通分布相結合的特點 ，尾部淺層 3 套縱向動靜脈係統 ，鼠尾背側為不規則動靜脈鏈狀結構 ，深層血管與淺層血管雙層籠狀以每節脊椎為單位溝通 ，且呈動靜脈血管徑不匹配的特點 。通過研究發現鼠尾存在兩套血源: 薦中動脈和臀上動脈 。其在尾部依尾橫動脈形成溝通 。尾橫動脈呈尾椎節段性分布 ，直接溝通尾正中動脈 、尾深動脈和皮支。在尾部被橫斷後 ，可以保持損傷節段以上尾椎的動靜脈回流通路; 鼠尾存在動靜脈口徑明顯不規範的現象: 尾外側靜脈明顯大於伴隨的動脈 ，而正中動脈明顯大於伴隨的靜脈 ，形成供血主要來自腹麵的尾正中動 ，回血主要依靠兩側的尾側靜脈 ，符合腹麵動脈保護的安全性 ，同時利於血管散熱 ，尾橫動脈提供了不同血源體係的溝通渠道 。參考文獻[王蕾 ，葉明霞.大鼠尾部血管的解剖結構與鼠尾的生理功能探討] 。

方法簡介 ：

實驗室分離的大鼠尾動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法 、並通過內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的大鼠尾動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 ：基礎培養基 ，含FBS 、EGF 、bFGF 、IGF 、VEGF 、Heparin 、Hydrocortisone 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：內皮細胞樣

傳代特性 ：可傳1-2代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

大鼠尾動脈內皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測試劑盒  ，英文名 ： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Porcine apolipoprotein A1 (apo-A1) ELISA Kit 豬載脂蛋白A1(apo-A1)檢測試劑盒

ELISA 小鼠凋亡誘導因子(mouse AIF)  進口分裝

CLIAKitforLPAb-IgG(HumanLegionellaaibodyIgG)ELISAKit人軍團菌抗體IgG

通用型DAB顯色溶液A液 ：10毫升B液 ：90毫升

ELISAKitIL-17雞白介素17

TNFSF11重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

表皮生長因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

ARL2BP重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

表皮生長因子(EGF)重組蛋白 Recombinant Epidermal Growth Factor (EGF)

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

TNFSF11重組小鼠 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IFNA8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白

ARL2BP重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 Protein

小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leukocyte aigen E (HLA-E) ELISA Kit 人類白細胞抗原E(HLA-E)檢測試劑盒

Humanpara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit 人對(PABA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ACTH檢測試劑盒魚促腎上腺皮質激素規格 ：96T/48T

油脂DNA萃取試劑盒10次

MouseIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit小鼠β幹擾素(IFN-β/IFNB)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠尾動脈內皮細胞小鼠胰島素檢測試劑盒   小鼠胰島素試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠胰島素試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠胰島素試劑盒 、小鼠胰島素檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠檢測試劑盒   小鼠試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠試劑盒、小鼠檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠氧化低密度脂蛋白抗體檢測試劑盒   小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠氧化低密度脂蛋白抗體試劑盒 、小鼠氧化低密度脂蛋白抗體檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

小鼠血小板因子檢測試劑盒   小鼠血小板因子試劑盒   規格型號 ：96T/48T   小鼠血小板因子試劑盒 ，規格型號 ：96T/48T ，來源 ：檢測試劑盒（進口分裝） ，產品別名 ：小鼠血小板因子試劑盒 、小鼠血小板因子檢測試劑盒   保存條件 ：2-8℃   保質期 ：6個月 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。