產品名稱 :大鼠冠狀動脈內皮細胞
產品特點 :大鼠冠狀動脈內皮細胞公司正在出售的產品C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞) 人支氣管平滑肌細胞HBSMC MRC-5(人胚肺成纖維細胞 ) HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA)
產品型號 :
更新日期 :2024-12-10
訪問次數 :28
大鼠冠狀動脈內皮細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
大鼠冠狀動脈內皮分離自冠狀動脈組織 ;冠狀動脈是供給心髒血液的動脈 ,起於主動脈根部 ,分左右兩支 ,行於心髒表麵 。采用Schlesinger等的分類原則 ,將冠狀動脈的分布分為三型 :右優勢型 、均衡型 、左優勢型 。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支 。左冠狀動脈為一短幹 ,發自左主動脈竇 ,經肺動脈起始部和左心耳之間 ,沿冠狀溝向左前方行後 ,立即分為前室間支和旋支 。前室間支沿前室間溝下行 ,旋支繞過心尖切跡至心的膈麵與右冠狀動脈的後室間支相吻合 。冠狀動脈內皮細胞呈單層扁平分布 ,是一薄層的專門上皮細胞 ,它形成冠狀動脈的內壁 ,是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口 。內皮細胞是沿著整個循環係統 ,由心髒直至小的微血管 。
產品名稱 | 大鼠冠狀動脈內皮細胞 | 組織來源 | 冠狀動脈 |
英文名稱 | Rat Coronary Artery Endothelial Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈內皮采用混合酶短暫消化後組織貼塊 、結合內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠冠狀動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 PLL(0.1mg/ml) ,明膠(0.1%)
培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
誌賀氏菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
痢疾杆菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
豬S-100B蛋白(S-100B)試劑盒
Human epidermal baseme membrane aibody (EBMZ) ELISA Kit 人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)試劑盒
PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISAKit 豬表皮生長因子(EGF)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforaGT(Mouseangiotensinogen)ELISAKit小鼠血管緊張素原
血液蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)試劑盒
EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標簽) Protein
CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原
IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標簽) Protein
AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標簽)
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白
CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原
AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標簽)
EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標簽) Protein
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白
IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標簽) Protein
大鼠冠狀動脈內皮細胞小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒
Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)試劑盒
HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 樣轉錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)試劑盒 進口分裝
Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP試劑盒人抗環胍肽抗體(CCP)試劑盒
植物活性線粒體分離試劑盒10次
Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒
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