老哥俱乐部

细胞简介：

大鼠肺大动脉内皮分离自肺大动脉组织；肺大动脉亦称肺动脉干

。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉
，经肺门入肺
。肺动脉干位于心包内
，为一粗短的动脉干。起自右心室
，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左、右肺动脉。左肺动脉较短，在左主支气管前方横行，分二支进入左肺上、下叶
。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上、中、下叶。细胞呈单层多角形铺路石状分布

；该细胞在维持血管内外的动态平衡
、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用
。肺大动脉内皮细胞呈单层多角形铺路石状分布，该细胞在维持血管内外的动态平衡
、合成和分泌细胞因子和介质、维持凝血和纤溶的动态平衡中起重要作用
。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肺大动脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肺大动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%
；CO2
，5%

实验报告：

一
、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织

，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化

；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

人总铁结合力（TIBC）试剂盒   96T/48T

人总前列腺特异抗原(tPSA)试剂盒   96T/48T

人总抗氧化能力(T-AOC)试剂盒   96T/48T

人总蛋白（TP）试剂盒   96T/48T

豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)试剂盒

HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β内啡肽受体(β-EPR)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP试剂盒人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)试剂盒规格：96T/48T

组织D-葡萄糖激酶法定量试剂盒20次

HumanProstaglandinE2
，PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)试剂盒规格
：96T/48T

CDH1重组小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型猪流感病毒H1N1-M2蛋白

USP46重组人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 标签) Protein

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)

蛋白激酶Cδ(PKCδ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签)

AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

大鼠肺大动脉内皮细胞小鼠乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒

Human visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)试剂盒

HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 人表面活性蛋白D(SP-D)试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapighepatocytegrowthfactor,HGF试剂盒豚鼠肝细胞生长因子(HGF)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量试剂盒20次

MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)试剂盒规格
：96T/48T

注意事项

：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好

，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化

，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，
，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿


。不是1个T25瓶传2个10cm皿。