產品名稱 :大鼠表皮角化細胞
產品特點 :大鼠表皮角化細胞公司正在出售的產品5637(人膀胱癌細胞) 大鼠源細胞 Butt's 淋巴瘤細胞 ,NAMALWA細胞 LLC-MK2細胞 ,綠猴恒河猴腎細胞 小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9 MCF-7-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)人癌細胞 人肺巨細胞癌低轉移細胞株;PG-LH7
產品型號 :
更新日期 :2024-12-10
訪問次數 :34
大鼠表皮角化細胞的詳細資料 :
實驗報告 :
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min;
4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h ;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
細胞簡介 :
大鼠表皮角化分離自皮膚組織 ;表皮位於動物皮膚的外層 ,由胚胎時期外胚層形成 ,具有抗摩擦和抗損傷的作用 。表皮是皮膚的淺層結構 ,由複層扁平上皮構成 。從基底層到表麵可分為五層 ,即基底層 、棘層 、顆粒層 、透明層和角質層 。表皮角化細胞(KC)是構成表皮的主要細胞成分 ,在體內處於不斷增殖過程中,分裂的角化細胞主要位於其基底層 ,少數位於棘細胞層 。隨著向表層的推移 ,細胞的分化程度逐漸增加 ,並喪失分裂活性 。
產品名稱 | 大鼠表皮角化細胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | Rat Epidermal Keratinized Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介
:
公司實驗室分離的大鼠表皮角化先消化 、後-膠原酶混合消化法製備而來 ,細胞總量約為5×10?cells/瓶 。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠表皮角化經PCNA免疫熒光鑒定 ,純度可達90%以上 ,且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。
培養信息
:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相 :空氣 ,95% ;CO2 ,5%
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
大鼠胱抑素S(CST4)檢測試劑盒 ,英文名 : CST4 ELISA Kit
Rabbit apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E(Apo-E)檢測試劑盒
乙型流感病毒(IBV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-5(Humanmaixmetalloproteinase5)ELISAKit人基質金屬蛋白酶5
體液基質金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitVK1犬K1
CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein
CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)
CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein
鴨白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai bactericidal permeability increasing protein aibody (BPI-Ab) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)檢測試劑盒
HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 人血管活性腸肽(VIP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACO-2(Humanaconitase2)ELISAKit人烏頭酸酶2
煙草葉片原生質細胞分離試劑盒5次
Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit小鼠纖溶酶抗纖溶酶複合物(PAP)檢測試劑盒規格 :96T/48T
大鼠表皮角化細胞氧化酶(XOD)測試盒(比色法)
植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)
(VitaminE)測定試劑盒(比色法)
超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒
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