產品僅供研究使用 ，不適用於人類或臨床診斷
商品屬性 ：

產品英文名稱 ：Mouse IL-33 Protein, His tag (Animal-Free)

產品中文名稱 ：重組小鼠白介素-33 ，His-標簽無動物源IL-33

規格 ：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號 ：EY-01X8761
用途 ：僅供科研研究實驗

特點&優勢:

分子:IL-33,IL-33,IL-33,IL-33

表達宿主:大腸杆菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來源於 ：小鼠IL-33 (Met108 -Ile266) (Q8BVZ5)的氨基酸序列 ，在C端帶有6×His標簽 。

活性:以其誘導 D10.G4.1 細胞增殖的能力來衡量 。這種效應的 ED₅₀ <40 pg/mL 。重組小鼠 IL-33 的比活力大於 2 x 10⁷ IU/mg 。

蛋白長度 ：該蛋白質的計算分子量為 18.51 kDa 。在還原條件下 ，該蛋白質遷移至 17-25 kDa（SDS-PAGE 分析）動겸動

背景

白細胞介素 33（IL-33）是一種 17.65 kDa 的細胞因子 ，含有 159 個氨基酸殘基 。IL-33 是 IL-1 家族的成員 ，由肥大細胞 、巨噬細胞 、內皮細胞和上皮細胞等多種細胞類型分泌 。當 IL-33 與主要在肥大細胞和 Th2 細胞中表達的 ST2 受體結合時 ，IL-33 會激活 NF-κB 和 MAPK 信號通路 ，從而刺激 IL-5 和 IL-13 等 2 型細胞因子的分泌 。除了 Th2 型反應外 ，IL-33 還參與維持屏障組織防禦 。

本產品具有下列特點:

 1.操作簡便 、快捷 。可直接加入到檢測平板 。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟 。

2. 無放射性 。不需要配製液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全 。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臢產物 。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數後可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成 。

操作步驟 ：

(一)獲得目的基因

1 、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上遊和下遊引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段 。

2 、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物 。

(二)構建重組表達載體

1 、載體酶切:將表達質粒用限製性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳後,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段 。

2 、PCR產物雙酶切後回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體 。

(三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

1 、 將連接產物轉化大腸杆菌DH5α,根據重組載體的標誌(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定 。

2 、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作 。否則應篩選更多克隆,重複亞克隆或亞克隆至不同酶切位點 。

3 、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞 。

(四)誘導表達

1 、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養 。

2 、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr) 。

3 、取部分液體作為未誘導的對照組,餘下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr 。

4 、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉澱,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min 。

5 、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析 。

公司正在出售的產品 ：

CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule 0.5mgCD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白細胞粘附分子抗原

CDC42 Protein Human 重組人 CDC42 / G25K 蛋白 (GST 標簽)

CD14重組小鼠 CD14 蛋白 Protein

CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標簽)

CMA1重組人 CMA1 / Chymase 1 蛋白 Protein

小鼠細小病毒(CPV)檢測試劑盒 96T/48T

Rat bone morphogenetic protein 7 (BMP-7) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)檢測試劑盒

Humanmacrophagechemotaticfactor,MCFELISAKit 人巨噬細胞趨化因子(MCF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenHerpessimplexvirusⅡaibody,HSVⅡ-Ab檢測試劑盒雞單皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

載玻片細胞CDK6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

Mouseheatshockprotein60,hSP-60ELISAKit小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠白介素19(IL19)檢測試劑盒  ，英文名 ： IL19 ELISA Kit

People with acridine orange (AO) ELISA Kit 人橙(AO)檢測試劑盒

BovinesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 牛可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCK(HumanCreatineKinase)ELISAKit人肌酸激酶

細胞脂質過氧化物(linoleicacid)細胞流式分析試劑盒10次

RatBonemorphogeneticproteieceptor1A,BMPR-1AELISAKit大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

重組小鼠白介素-33 ，His-標簽無動物源IL-33CD14重組小鼠 CD14 蛋白 Protein

CD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule 0.5mgCD166/ALCAM(activated leukocyte celladhesion molecule) 活化白細胞粘附分子抗原

CMA1重組人 CMA1 / Chymase 1 蛋白 Protein

CDC42 Protein Human 重組人 CDC42 / G25K 蛋白 (GST 標簽)

CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白 (Fc 標簽)