老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力
，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态
、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度
、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件
，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学
、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时

，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜
、流式细胞术
、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备
。
​
培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布
； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻
； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

皂苷A（醉鱼草皂苷 Ⅳb） CAS  规格：20mg 订购|咨询

脱水羊藿素;Anhydroicarit CAS 38226-86-7 规格：20mg 订购|咨询

芦荟苷 CAS 1415-73-2 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

4-三胺（来米特杂质I） CAS  规格：50mg 订购|咨询

CAS 57-67-0 规格
：100mg 订购|咨询

;Homoharringto CAS 26833-87-4 规格

：20mg 订购|咨询

丹酚酸A CAS 96574-01-5 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

原花青素B2 CAS 29106-49-8 规格：10mg 订购|咨询

CAS 75481-73-1 规格
：100mg 订购|咨询

Α-波菜甾醇;A-Spinasterol CAS 481-18-5 规格
：20mg 订购|咨询

L-蛋氨酸 CAS 63-68-3 规格：20mg 订购|咨询

C918细胞
，人眼脉络黑色素瘤细胞供应商Alexa Fluor 647标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/Alexa Fluor 647 0.1ml

PE-Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy5.5 0.1ml

PE-Cy7标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE-Cy7 0.1ml

Cy5.5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5.5 0.1ml

Cy7标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy7 0.1ml

Cy5标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy5 0.1ml

Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3 0.1ml

牛血清白蛋白（第五组分）BSA (bovine serum albumin) 5g

FITC标记蛋白-GProtein G/FITC 0.5ml

Cholesterol 100g

β淀粉样肽1-16（多肽蛋白）Beta-Amyloid(1-16) 0.5mg

细胞培养方法
：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞

，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中

。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。