老哥俱乐部

细胞简介
：

颈位于下部，近似圆锥体
，长 2.5～3cm，上端与体相连，下端深入
。宫颈的大小与宫体比例随年龄及状态等而变化

。宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一，占女性生殖系统恶性肿瘤的。体外分离、培养宫颈癌细胞，不但是细胞水平及分子水平等方面研究肿瘤病因及的基础

，还是宫颈癌组织工程研究的基本环节。

细胞特性
：

1）细胞来源于人宫颈癌组织
。

2)细胞鉴定：CD44荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体
、
、酵母和。

5)细胞生长方式：长梭形
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 Delf原代肿瘤细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液

，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min

，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养

；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5

、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

小鼠β细胞素(BTC)elisa检测试剂盒免费代测

人甘油三酯(TG)elisa检测试剂盒免费代测

细胞VZV（VARICELLA ZOSTER）病毒定量PCR扩增检测试剂盒

羊α晶体B链(CRYAB)elisa分析检测试剂盒

大鼠热休克蛋白27(HSP-27)elisa检测试剂盒

PSD95结合蛋白4抗体  Anti-SAPAP4/DLGAP4

环指蛋白210抗体  Anti-RFPL4A/RNF210

NDUFA9蛋白抗体  Anti-NDUFA9

WW结构域E3泛素连接酶1抗体  Anti-WWP1

膜相关环指蛋白6抗体 6-Mar

脑糖原磷酸化酶抗体 GPBB

FITC标记人CD25单克隆抗体 human CD25/FITC

FLJ39060蛋白抗体 FLJ39060

血栓调节蛋白抗体 Thrombomodulin

液泡蛋白分选蛋白29抗体 VPS29

低密度脂蛋白受体结构域蛋白1抗体 LDLRAD1

端粒调控因子2抗体 Tankyrase 2

糖皮质调节元件结合蛋白1抗体 GMEB1

酮戊二酸脱氢酶OGDH抗体 OGDH

RAS癌基因相关蛋白RAB7抗体 RAB7A

RNA聚合酶II抗体 RNA polymerase II

40S核糖体蛋白S5抗体 RPS5

7号染色体开放阅读框62抗体 C7orf62

角蛋白相关蛋白20.4抗体 KAP20.4

大鼠芳香酶(ARO)elisa检测试剂盒

cAMP ELISA Kit

人胞浆型磷脂酶A2-α(cPLA2-α)elisa生化检测试剂盒

人宫颈癌细胞cPLA2-αELISAKit

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息

，如细胞形态
、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等

，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态
。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系

，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。