老哥俱乐部

细胞简介：

股骨头（ caput femoris）呈圆形，约占一圆球的2/3，其上为关节软骨所覆盖，在其顶部微后有一小窝
，称为股骨头凹

，为股骨头韧带附着处
，股骨头可由此获得少量血供。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的股骨头动脉组织
。

2)细胞鉴定
：血管假性血友病因子（vWF）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1

、 HBV、HCV、支原体、
、酵母和。

5）细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养
。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 DELF原代 内皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一
、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置

；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬

，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃
，5％CO2 培养箱中培养
；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗

，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)检测试剂盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit

Rabbit urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 兔型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)检测试剂盒

汉坦病毒Ⅰ型(HTV-Ⅰ)核酸检测试剂盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMousec-junELISAKit小鼠c-jun

体液氧化酶活性荧光定量检测试剂盒20次

ELISAKit16-αOHE-1人16α羟基雌同1

CEACAM6重组人 CEACAM6 / CD66c 蛋白 (His 标签) Protein

血管内皮生长因子A(VEGFA)重组蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)

HA重组甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

ANGPTL5 Protein Human 重组人 ANGPTL5 蛋白 (GST 标签)

Spike Protein Human coronavirus 重组人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 标签)

血管内皮生长因子A(VEGFA)重组蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGFA)

ANGPTL5 Protein Human 重组人 ANGPTL5 蛋白 (GST 标签)

CEACAM6重组人 CEACAM6 / CD66c 蛋白 (His 标签) Protein

Spike Protein Human coronavirus 重组人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 标签)

HA重组甲型流感 H1N1 (A/Brisbane/59/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

猪核转录因子kb-p65(NF-kB p65)ELISA 试剂盒

Human desmin (Des) ELISA Kit 人结蛋白(Des)检测试剂盒

PorcineC-reactiveprotein,CRPELISAKit 猪C反应蛋白(CRP)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAlpha-Gal(MouseAlpha-galactoyl)ELISAKit小鼠α半乳糖基抗原

血液结合(酯化)酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Placalmodulin,CAMELISAKit植物钙调素(CAM)检测试剂盒

小鼠股骨头微血管内皮细胞猪肠三叶因子检测试剂盒   猪肠三叶因子试剂盒   规格型号：96T/48T   猪肠三叶因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）


，产品别名
：猪肠三叶因子试剂盒、猪肠三叶因子检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

猪白介素1检测试剂盒   猪白介素1试剂盒   规格型号
：96T/48T   猪白介素1试剂盒
，规格型号
：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：猪白介素1试剂盒、猪白介素1 检测试剂盒   保存条件

：2-8℃   保质期：6个月

。

鸡极低密度脂蛋白检测试剂盒   鸡极低密度脂蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   鸡极低密度脂蛋白试剂盒

，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：鸡极低密度脂蛋白试剂盒
、鸡极低密度脂蛋白检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

鸡5核苷酸酶检测试剂盒   鸡5核苷酸酶试剂盒   规格型号：96T/48T   鸡5核苷酸酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：鸡5核苷酸酶试剂盒、鸡5核苷酸酶检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题

，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况
，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决
。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 
。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。