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      琥珀酸脱氢酶(SDH)操作步骤
      点击次数 :1641 更新时间 :2021-08-26

      操作步骤:

      1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl ,然后在di一 、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀 ;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔 ,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀 ;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五 、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七 、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中 ,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L ,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L) 。

      2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

      3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

      4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。

      5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液 ,静置30秒后弃去 ,如此重复5次,拍干 。

      6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl ,空白孔除外。

      7. 温育:操作同3。

      8. 洗涤:操作同5。

      9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl ,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

      10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

      11. 测定:以空白空调零 ,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟 。

      嗜酸性粒细胞过氧化物酶抗体

      核酸内切酶G抗体

      蛋白激酶受体A10抗体

      胞吐囊复合体蛋白2抗体

      磷酸化4E结合蛋白1抗体

      磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

      泛素交联酶抗体

      EB病毒核抗原抗体-3B抗体

      磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体

      乙酰基转移酶EID1抗体

      微管相关蛋白EB家族3抗体

      真核翻译起始因子5抗体

      遗传性前列腺癌蛋白2抗体

      磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

      磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

      磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体

      染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体

      上皮细胞微管相关蛋白7抗体

      碱性鞘磷脂酶7抗体

      表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体

      长链脂肪酸延长酶长ELOVL6抗体

      蛋白激酶受体A6抗体

      蛋白激酶受体A3抗体

      蛋白激酶受体A7抗体

      蛋白激酶受体B1抗体

      磷酸化蛋白激酶受体B1抗体


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