操作步驟 :
1. 標準品的稀釋與加樣 :在酶標包被板上設標準品孔10孔 ,在di一 、第二孔中分別加標準品100μl ,然後在di一 、第二孔中加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後從di一孔 、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔 ,再在第三 、第四孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉 ,再各取50μl分別加到第五 、第六孔中 ,再在第五 、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul ,混勻 ;混勻後從第五 、第六孔中各取50μl分別加到第七 、第八孔中 ,再在第七 、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第七 、第八孔中分別取50μl加到第九 、第十孔中 ,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉 。(稀釋後各孔加樣量都為50μl ,濃度分別為180 ng/L ,120 ng/L ,60 ng/L ,30 ng/ ,15 ng/L) 。
2. 加樣 :分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ,其餘各步操作相同) 、待測樣品孔 。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。
3. 溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。
4. 配液 :將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用 。
5. 洗滌 :小心揭掉封板膜,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液 ,靜置30秒後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。
6. 加酶 :每孔加入酶標試劑50μl ,空白孔除外 。
7. 溫育 :操作同3 。
8. 洗滌 :操作同5 。
9. 顯色 :每孔先加入顯色劑A50μl ,再加入顯色劑B50μl ,輕輕震蕩混勻 ,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止 :每孔加終止液50μl ,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
11. 測定 :以空白空調零 ,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾 。
嗜酸性粒細胞過氧化物酶抗體
核酸內切酶G抗體
蛋白激酶受體A10抗體
胞吐囊複合體蛋白2抗體
磷酸化4E結合蛋白1抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體
泛素交聯酶抗體
EB病毒核抗原抗體-3B抗體
磷酸化驅動蛋白樣蛋白1抗體
乙酰基轉移酶EID1抗體
微管相關蛋白EB家族3抗體
真核翻譯起始因子5抗體
遺傳性前列腺癌蛋白2抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體
染色體區域穩定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區域穩定必需蛋白抗體
上皮細胞微管相關蛋白7抗體
堿性鞘磷脂酶7抗體
表皮生長因子樣重複折疊1結構域蛋白3抗體
長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6抗體
蛋白激酶受體A6抗體
蛋白激酶受體A3抗體
蛋白激酶受體A7抗體
蛋白激酶受體B1抗體
磷酸化蛋白激酶受體B1抗體