老哥俱乐部

样本实验前准备：
ELISA试剂盒液体样本：包括血清

、血浆、尿液、胸腹水
、脑脊液、细胞培养上清等。
（1）血清
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清
。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
（2）血浆
：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂
，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）
。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
。
（3）尿液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
。胸腹水、脑脊液参照此实行。
（4）细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集

。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。
（5）培养细胞
检测细胞内的成份时
，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液
，细胞浓度达到100万/ml左右
。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清
。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心
。
（6）组织标本
切割标本后，称取重量
。加入一定量的PBS
，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4）
，或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测
，其余冷冻备用。

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