準備試劑與收集血樣 ：
雙重核酸試劑盒（熒光PCR法） 1. 收集標本
：血清
、血漿（EDTA
、檸檬酸鹽
、肝素抗凝）
、細胞培養上清液
、組織勻漿等盡早檢測
， 2-8 ℃ 保存48 小時
；更長時間須冷凍（ -20 ℃或 -70 ℃ ）保存
，避免反複凍融
。
2. 標準品液配製
：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻
，配成 120 0ng/ml 的溶液
。 設標準 管 8 管
，管加標本稀釋液 900ul
，第二至第八管加入標本稀釋液 500ul
。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻後用加樣器吸出 500ul
，移至第二管
。如此反複作對倍稀釋
，從第七 管 中吸出 500ul 棄去
。第八 管 為空白對照
。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋（ 示例
： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）
。
4. 洗滌液
：用重蒸水 1:20 稀釋（示例
：1ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）
檢測程序
：
1. 加樣
：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul
，將反應板充分混勻後置 37 ℃ 120 分鍾
。
2. 洗板
：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次
，向濾紙上印幹
。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul
。將反應板充分混勻後置 37 ℃ 6 0 分鍾
。
4. 洗板
：同前
。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul
。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鍾
。
6. 洗板
：同前
。
7. 每孔加入底物工作液100ul
，置 37 ℃ 暗處反應15 分鍾
。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻
。
9. 30分鍾內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值
。
性能
：
1. 準確性
：標準品線性回歸與預期濃度相關係數R值
，大於等於0.9900
。
2. 靈敏度
：檢測濃度小於0.1 U/mL
。
3. 特異性
：不與其它可溶性結構類似物交叉反應
。
4. 重複性
：板內
、板間變異係數均小於15%
。
5. 貯藏
：2-8℃
，避光防潮保存
。
6. 有效期
：6個月
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