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溫和氣單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒操作步驟
點擊次數 :670 更新時間 :2020-07-23

操作步驟 :

一、樣品采集 :
1 、食品樣品 :樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行 。
2 、血液樣品 :用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL ,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管 ,立即混勻 。
3 、糞便樣品 :取糞便置於滅菌的收集管中送檢 。
4 、病灶部位樣品 :取發病部位新鮮滲出物 、粘液膿血送檢 。
一 、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意 :由於標準品濃度非常高 ,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行 ,千萬不能汙染樣品或本試劑盒的其他成分) 。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原 ,本產品不提供活體樣品做陽性對照 ,隻提供可以直接使用的 DN段作為陽性對照 。
2. 標記 6 個離心管 ,分別為 7 ,6 ,5 ,4 ,3 ,2 。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭 ,下同) 。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照 ,充分震蕩 1 分鍾 ,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照 。放冰上待用 。
5. 換槍頭 ,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得) ,充分震蕩 1 分鍾 ,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照 。放冰上待用
6. 換槍頭 ,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中 ,充分震蕩 1 分鍾 ,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照 。放冰上待用 。
7. 重複上麵的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照 。放冰上待用 。

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