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無漿體通用PCR檢測試劑盒組成及試劑配製
點擊次數 :718 更新時間 :2020-05-19

組成及試劑配製:

1 、酶標板 :一塊(96孔)

2 、 標準品(凍幹品) : 2瓶 ,請臨用前15分鍾內配製 。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml ,蓋好後室溫靜置大約10分鍾 ,同時反複顛倒/搓動以助溶解 ,其濃度為200 U/L ,然後做係列倍比稀釋(注 :不要直接在板中進行倍比稀釋) ,分別配製成200 U/L,100 U/L ,50 U/L ,25 U/L ,12.5 U/L ,6.25 U/L ,3.12 U/L ,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L 。如配製100 U/L標準品 :取0.3ml (不要少於0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中 ,混勻即可 ,其餘濃度以此類推 。

3 、 樣品稀釋液 :1×20ml 。

4 、 檢測稀釋液A :1×10ml。

5、 檢測稀釋液B :1×10ml 。

PCR反應的特異性決定因素為 :

①引物與模板DNA特異正確的結合 ;

②堿基配對原則 ;

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性 ;

④靶基因的特異性與保守性 。

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