洗滌
       洗滌在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反應步驟 ，但卻決定著實驗的成敗 。ELSIA就是

靠洗滌來達到分離遊離的和結合的酶標記物的目的 。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相

抗原或抗體結合的物質 ，以及在反應過程中非特異性地吸附於固相載體的幹擾物質 。聚苯乙烯

等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的 ，而在洗滌時應把這種非特異性吸附的幹擾物質洗滌下來 。

可以說在ELISA操作中 ，洗滌是zui主要的關鍵技術 ，應引起操作者的高度重視 ，操作者應嚴格

按要求洗滌 ，不得馬虎 。
       
洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩衝液 。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的 ，非離

子型洗滌劑既含疏水基團 ，也含親水基團 ，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從

而削弱蛋白質與固相載體的結合 ，並借助於親水基團和水分子的結合作用 ，使蛋白質回複到水

溶液狀態，從而脫離固相載體 。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20 ，其濃度可在

0.05%-0.2%之間 ，高於0.2%時 ，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度 。
       
洗板時注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋 ，應按要求稀釋 ，所用的水電導率

在1.5us/cm之下 ，洗液如果結晶應待其融解後配製 。保證洗板浸泡時間為40秒左右 ，孔內

液體被洗板機吸收得越幹淨洗滌效果更好 ，手工洗板防止洗液在孔內形成氣泡 。

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