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洗涤
       洗涤在ELISA试剂盒过程中虽不是一个反应步骤，但却决定着实验的成败。ELSIA就是

靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相

抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯

等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的，而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来
。

可以说在ELISA操作中，洗涤是zui主要的关键技术，应引起操作者的高度重视，操作者应严格

按要求洗涤
，不得马虎。
       
洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液
。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的，非离

子型洗涤剂既含疏水基团，也含亲水基团
，其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合，从

而削弱蛋白质与固相载体的结合

，并借助于亲水基团和水分子的结合作用
，使蛋白质回复到水

溶液状态，从而脱离固相载体
。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20

，其浓度可在

0.05%-0.2%之间，高于0.2%时，可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
       
洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释，应按要求稀释，所用的水电导率

在1.5us/cm之下，洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40秒左右
，孔内

液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好，手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。

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