因而含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,實驗的特異性
、敏感性均由此得以改進
,重複性亦佳
。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是經過物理吸附的
,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體外表的疏水基團間的作用於
。可將聚苯乙烯板先經紫外線照耀(例如30W紫外燈
,75cm照耀12小時)
,以添加其吸附性能
。例如
,在查看抗DNA抗體時
,需用DNA作為包被抗原
,ELISA試劑盒而遍及的固相載體通常不能直接與核酸
。換言之,包被便是抗原或抗體到固相載體外表的進程
。當抗原決定簇存在於或鄰近於疏水區域時
,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充沛暴露
,在這種情況下
,直接包被作用欠安
,能夠采用直接的捕獲包被法
,即先將對於該抗原的特異抗體作預包被
,這以後經過抗原
。也可用親和素係統作直接包被
,即用親和素先包被載體
,然後參加化的DNA
,這種包被辦法均勻
、牢固
,已擴展應用於各種抗原物質的定量測定
。
ELISA試劑盒的基本原理有三條
:
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附於固相載體外表
,可能是蛋白和聚苯乙烯外表間的疏水性部分彼此吸附
,並堅持其免疫學活性
;
(2)抗原或抗體可經過共價鍵與酶銜接形成酶物
,ELISA試劑盒而此種酶物仍能堅持其免疫學和酶學活性
;
(3)酶物與相應抗原或抗體後
,可根據參加底物的色彩反響來斷定是不是有免疫反響的存在
,並且色彩反響的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的
,因而
,能夠按底物顯色的程度顯示實驗成果
。法是免疫診斷中的一項新技術
,現已成功地應用於多種病原微生物所導致的流行症
、寄生蟲病及非流行症等方麵的免疫診斷
。也已應用於大分子抗原和小分子抗原的定量測定,ELISA試劑盒根據現已使用的成果,以為法具有靈敏
、特異
、簡略
、快速
、安穩及易於自動化操作等特色
。不隻適用於標本的查看
,並且由於一天以內能夠查看幾百乃至上千份標本,因而
,也適合於血清流行病學調查
。
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