操作步驟
1. 標準品的稀釋 ：本試劑盒提供原倍標準品一支 ，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋 。
2000 ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
1000 ng/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
500 ng/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
250 ng/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
125 ng/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
2. 加樣 ：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ，其餘各步操作相同） 、標準孔 、
待測樣品孔 。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl ，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ，
然後再加待測樣品10μl（樣品*終稀釋度為5 倍） 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ，盡
量不觸及孔壁 ，輕輕晃動混勻 。
3. 溫育 ：用封板膜封板後置37℃溫育30 分鍾 。
4. 配液 ：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋後備用
5. 洗滌 ：小心揭掉封板膜 ，棄去液體 ，甩幹 ，每孔加滿洗滌液 ，靜置30 秒後棄去 ，如此
重複5 次 ，拍幹 。
6. 加酶 ：每孔加入酶標試劑50μl ，空白孔除外 。
7. 溫育 ：操作同3 。
8. 洗滌 ：操作同5 。
9. 顯色 ：每孔先加入顯色劑A50μl ，再加入顯色劑B50μl ，輕輕震蕩混勻 ，37℃避光顯色
10 分鍾.
10. 終止：每孔加終止液50μl ，終止反應（此時藍色立轉黃色） 。
11. 測定 ：以空白空調零 ，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 。 測定應在加終止
液後15 分鍾以內進行 。

上一篇 ELISA試劑盒的三條基本原理 下一篇 ELISA測定中試劑的預備zui要害