免疫測定自20世紀70年代初創立以來
,由於其具有特異
、靈敏
、簡便
、快速的特點
,現已在生物醫學研究領域及臨床疾病的診療中得到了廣泛的應用
,相對於放射免疫測定(RIA)技術來說
,EIA還有試劑半衰期長
,對環境汙染小
,試驗廢物易於處理等優點
,但測定敏感性一般較RIA低
,於是
,為提高EIA的測定敏感性
,出現了眾多的EIA測定放大係統
,使EIA的測定敏感性趕上甚或超過了RIA
。
建立正IA測定放大係統的一般原則
EIA本身是以酶[辣根過氧化物酶(HRP)
、堿性磷酸酶(AP)等]作標記物的
,因此
,EIA的測定放大始終是圍繞著標記酶來作文章的
,不外乎三種可能的方式
:①增加標記酶的量
;②非顯色底物的應用
;③附加一個受標記酶催化的反應係統
。
一
、增加標記酶的量
通過/親合素—酶或酶/抗酶複合物的間接方法
,可以增加ELISA測定中zui後所測定的標記酶的量
。這種方法雖在一定程度上由於標記酶的聚集增加了EIA的測定敏感性
,但同時有增加非特異的背景顯色的可能
。
二
、非顯色底物的應用
從酶的反應底物著手
,使用具有高測定敏感性的非顯色底物如熒光素或發光物
,從而提高EIA的測定敏感性
,這種方法的優點是不需額外的步驟及試劑製備
,缺點是需要特殊的測定儀器
。
三
、附加一個受標記酶催化的反應係統
原始標記酶催化附加一個反應係統
,如酶底物反應循環或酶級聯反應
,從而達到反應放大的目的
。這種由數個催化反應的耦聯而構建的放大係統
,是酶放大的根本之所在
,敏感性的提高來源於真正的信號放大
,而不是簡單地將一個分子轉變為更多的易於測定的分子
。一個適用的酶放大係統的選擇除了要考慮生化因素外
,zui為重要的是酶及其底物的穩定性
,並要易於獲得
,因其對試驗的準確性和重複性有較大的影響
。
培養基 進口
、國產 Glycine Medium 用於彎曲杆菌耐受性試驗(GB標準) 250
快速硫化氫試驗瓊脂 進口
、國產 H2S Test Medium 用於彎曲杆菌的硫化氫試驗(GB標準) 250
DNA酶甲基綠瓊脂基礎 進口、國產 Dnase Agar Base with Methyl Green 用於彎曲杆菌的DNA酶水解試驗(GB標準) 100
馬尿酸鈉培養基 進口
、國產 用於彎曲杆菌的馬尿酸鈉水解試驗(GB標準) 100
快速硫化氫(H2S)試驗瓊脂 進口
、國產 用於彎曲杆菌的硫化氫試驗(GB標準) 250
波爾頓選擇性增菌肉湯 進口
、國產 Bolton Selective Enrichment broth 用於彎曲杆菌選擇性增菌培養(Merck方法) 250
CCDA基礎 進口
、國產 CCDA Base 用於彎曲杆菌分離培養(WHO方法) 250
CCDA添加劑 進口
、國產 CCDA Supplement 每支添加於200mlCCDA基礎中 2ml*10支
Campy-Cefex 瓊脂基礎 進口
、國產 Campy-Cefex Agar Base 用於彎曲杆菌分離培養(FDA方法) 250
Campy-Cefex 添加劑 進口
、國產 Campy-Cefex Supplement 每支添加於200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎中 2ml*10
上一篇 抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒損失的程度項研究顯示 下一篇 VE Elisa Kit,GSK Elisa Kit有哪些操作應用領域