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蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒操作原理及注意事項
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:1063 更新時間
:2017-10-27
蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒操作原理及注意事項
蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒是目前實驗室zui常用的試劑盒之一
,其主要原因是因為使用了操作原理簡單
,方便
,快捷
,大大的提高了實驗效率
。
ELISA試劑盒的操作方法zui常用的是雙抗夾心法
,雙抗體夾心法原理主要是
:固相載體上包被抗體
,再加入待測抗原(可以是血清或者其它樣本)
,洗板(洗掉非特異性吸附)
,再加入酶標抗體
,再洗板(洗掉非特異性吸附)
,再加底物顯色
。
在操作過程中有幾點需要注意
:
①抗原是大分子抗原
,具有2個以上的抗原表位
;
②包被抗體和酶標記的抗體都是針對抗原的特異性抗體
,隻不過它們分別針對的是不同抗原表位
,經常被稱作一抗和二抗
;蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒
③酶是催化底物顯色的
,起到一個信號放大作用
。
ELISA試劑盒具體操作步驟如下
:
1)將特異性抗體與固相載體聯結
,形成固相抗體
。洗滌除去未結合的抗體及雜質
。
2)加受檢標本
,保溫反應
。標本中的抗原與固相抗體結合
,形成固相抗原抗體複合物
。洗滌除去其他未結合物質
。
3)加酶標抗體
,保溫反應
。固相免疫複合物上的抗原與酶標抗體結合
。*洗滌未結合的酶標抗體
。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關
。
4)蔗糖磷酸合成酶Elisa試劑盒加底物顯色
。固相上的酶催化底物成為有色產物
。通過比色
,測知標本中抗原的量
。
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