水溶液中的氨基酸為兼性離子 ，因而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基 。甲醛可與氨基酸上的—N+H3結合 ，形成—NH—CH2OH 、—N(CH2—OH)2 等羥甲基衍生物 ，使N+H3上的H+遊離出來 ，這樣就可以用堿滴定N+H3放出H + ，測出氨基氮 ，從而計算氨基酸的含量 。

    若樣品中隻含有單一的已知氨基酸 ，則可由此法滴定的結果算出氨基酸的含量。若樣品中含有多種氨基酸（如蛋白質水解液） ，測不能由此法算出氨基酸的含量 。 

    與甲醛作用後 ，生成的化合物不穩定 ，導致滴定後結果偏低 ；含酚基結構 ，導致滴定結果偏高 。 

測定氨基酸含量的材料 、試劑與器具 

（一）試劑 

1 、0.5%酒精溶液 

稱0.5g溶於100ml60%酒精中 。 

2 、0.05%溴藍溶液 

取0.05溴麝行草酚藍溶於100ml 20%乙醇溶液中 。 

3 、1%溶液 

取1g溶於100ml蒸餾水 。 

4 、標準0.100mol/L 氫氧化鈉溶液 

5 、中性甲本醛溶液 

    取50ml ，加0.5%指示劑約3ml ，滴加0.1mol/LnaOH溶液 ，使溶液呈微粉紅色 ，臨用前中和 。 

（二）實驗器具 

1 、錐形瓶 2 、堿式滴定管 

3 、 移液管洗耳球 4 、天平 

5 、容量瓶 6 、試劑瓶 

7 、量筒 8 、玻棒與燒杯 

    注意事項  ：利用甲醛滴澱法可以用來測定蛋白質的水解程度 。隨著蛋白質水解度的增加 ，滴定值也增加 ，當蛋白質水解完成後 ，滴定值不再增加 。

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