老哥俱乐部

细胞简介：

猪雪旺氏分离神经组织
；周围神经系统中的神经胶质细胞称施万（schwann，又名雪旺细胞）细胞
，它沿神经元的突起分布。施万细胞包裹在神经纤维上，这种神经纤维叫有髓神经纤维。有髓神经纤维和无髓神经纤维的施万细胞的形态和功能有所差异，施万细胞的外表面有基膜
，能分泌神经营养因子，促进受损的神经元的存活及其轴突的再生，参与周围神经系统中神经纤维的构成。施万细胞的胞核呈长卵圆形，其长轴与轴突平行，核周有少量胞质。由于施万细胞包在轴突的外面，故又称神经膜细胞（neurilemmalcell），它的外面包有一层基膜。施万细胞外面的一层胞膜与基膜一起往往又称神经膜（neurilemma）

，光镜下可见此膜。在有髓神经纤维发生中
，伴随轴突一起生长的施万细胞表面凹陷成一纵沟，轴突位于纵沟内，沟缘的胞膜相贴形成轴突系膜（mesaxon）。轴突系膜不断伸长并反复包卷轴突
，把胞质挤至细胞的内、外边缘及两端（即靠近郎氏结处）

，从而形成许多同心圆的螺旋膜板层

，即为髓鞘。故髓鞘乃成自施万细胞的胞膜
，属施万细胞的一部分。施万细胞的胞质除见于细胞的外
、内边缘和两端外，还见于髓鞘板层内的施－兰切迹
。该切迹构成螺旋形的胞质通道
，并与细胞外、内边缘的胞质相通。

方法简介：

实验室分离的猪雪旺氏采用 - 胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的猪雪旺氏经S-100免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体、细菌
、酵母和真菌等

。

培养信息
：

培养基：含FBS
、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态

：双极
、多极形

传代特性：可传1-2代

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%
；CO2，5%

猪雪旺氏体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态
。

实验报告
：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后

，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

大鼠白细胞介素1β(IL-1B)检测试剂盒 
，英文名

： IL-1B ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 3 beta (MIP-3 beta /ELC/CCL19) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)检测试剂盒

MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit 小鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanomeinELISAKit人网膜素

同位素核酸-蛋白结合凝胶电泳定量分析(McKay)试剂盒20次

ELISAKitsVCAM-1大鼠可溶性血管细胞粘附分子1

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag 100ugrh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag)-1受体拮抗剂

REG1B重组人 REG1B / PSPS2 蛋白 Protein

EFNA4 Protein Human 重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 标签)

TNFRSF14 Protein Human 重组人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签)

rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag 100ugrh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) 1受体拮抗剂

EFNA4 Protein Human 重组人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 标签)

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

TNFRSF14 Protein Human 重组人 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 标签)

REG1B重组人 REG1B / PSPS2 蛋白 Protein

小鼠结缔组织生长因子(CTGF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human gasic carcinoma marker -CA153ELISA Kit 人癌标志物-CA153检测试剂盒

HumanProteinCELISAKit 人蛋白C(ProteinC)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-cailage-aibody检测试剂盒人抗软骨抗体(ai-cailage-Ab)检测试剂盒规格：96T/48T

植物琥珀酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次

Humanα-Endomorphin，α-EPELISAKit人α-内肽(α-EP)检测试剂盒规格：96T/48T

猪雪旺氏细胞小鼠低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠蛋白质二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠蛋酸酯酶2B（PP-2B）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠蛋酸酶(PP)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液

、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。