細胞簡介 ：

小鼠胃平滑肌分離自胃組織 ；胃柔軟 ，活體呈橘紅色 。胃空虛時形成許多皺襞 ，充盈時變平坦 。胃壁由粘膜 、粘膜下膜 、肌膜和漿膜四層構成 。粘膜上皮為柱狀上皮 。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體（胃底腺 、賁門腺 、幽門腺） ，它們的分泌物混合形成胃液 ，對食物進行化學性消化 。粘膜在幽門處由於覆蓋幽門括約肌的表麵而形成環狀的皺襞叫幽門瓣 。胃肌膜由三層平滑肌構成 ，外層縱形 ，中層環形 ，內層斜行 ，其中環形肌發達 ，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌 。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層 ，細胞通過緊密連接，進行同步性運動 ，完成肌肉的舒縮活動 ，以推動食物前進 ，完成對食物的機械性消化 ，並促進化學性消化和吸收 。胃平滑肌具有肌組織的共同特性 ，如興奮 、自律性 、傳導性和收縮性 ，在離體後 ，置於適宜的環境內 ，仍能進行良好的節律性運動 ，但其收縮很緩慢 ，節律性遠不如心肌規則。胃平滑肌對電刺激較不敏感 ，但對於牽張 、溫度和化學刺激則特別敏感 ，輕微的刺激常可引起強烈的收縮 。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環境分不開的 ，胃內容物對平滑肌的牽張 、溫度和化學刺激是引起內容物推進或排空的自然刺激因素 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠胃平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠胃平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

小鼠胰島素(INS)試劑盒   96T/48T

小鼠原激活肽(TAP)試劑盒   96T/48T

小鼠(ypsin)試劑盒   96T/48T

小鼠合成酶(NOS)試劑盒   96T/48T

小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat complexed prostate specific aigen (CPSA) ELISA Kit 大鼠複合前列腺特異性抗原(CPSA)試劑盒

Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Aflatoxin,AFT試劑盒黴毒素(AFT)試劑盒規格 ：96T/48T

油脂DNA萃取試劑盒10次

MouseIerferonα,IFN-αELISAKit小鼠α幹擾素(IFN-α)試劑盒規格 ：96T/48T

SDC1重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein

Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原 0.5mgAkt/PKB 蛋白激酶B(抗原)

IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

KIT Protein Rat 重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標簽)

Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原 0.5mgAkt/PKB 蛋白激酶B(抗原)

CD40LG Protein Human 重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)

SDC1重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白 Protein

KIT Protein Rat 重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標簽)

IL17A重組人 IL17 / IL17A 蛋白 Protein

小鼠胃平滑肌細胞大鼠低密度脂蛋白(LDL-C)試劑盒  ，英文名 ： LDL-C ELISA Kit

Porcine angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 豬血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒

菌核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T

CLIAKitforLR/Ob-RELISAKit大鼠苗條素受體

通用抗體稀釋溶液10/100毫升

ELISAKitAmAC-1雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。