細胞簡介 ：

小鼠輸尿管上皮分離自輸尿管組織 ；輸尿管上接腎盂 ，下連膀胱 ，是一對細長的管道 ，呈扁圓柱狀 ，位於腹膜後 ，為一肌肉粘膜所組成管狀結構 ，沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆 。輸尿管有三個狹窄部 ：一個在腎盂與輸尿管移行處（輸尿管起始處） ；一個在越過小骨盆入口處 ；後一個在進入膀胱壁的內部 。這些狹窄是結石 、及壞死組織容易停留的部位 。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構 ，即瓦耳代爾鞘 ，它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管 。臨床上將輸尿管分為上 、中 、下三段 ，也可稱為腹段 、盆段 、膀胱段 。其中 ，腹段自腎盂輸尿管交界處 ，到跨越髂動脈處 ；盆段 ，自髂動脈到膀胱壁；膀胱段 ，自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口 。輸尿管管壁分為4層 ，黏膜層 、固有層 、肌層 、外膜 。黏膜層表麵為移行上皮 ，約有4-5層細胞 ；固有層由細密的結締組織構成 ，內含膠原纖維和少量彈性纖維 ；輸尿管肌層主要由內縱和外環兩層平滑肌組成 ；外膜為疏鬆結締組織 ，營養血管由外膜進入輸尿管 。其中 ，輸尿管上皮細胞主要分布於黏膜層 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠輸尿管上皮采用先消化 、然後機械分離法使輸尿管分層 、後膠原酶消化 ，並通過上皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠輸尿管上皮經PCK免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

血管內皮生長因子受體 1(VEGF-R3)   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T   美國 R&D

sVE-Cadherin   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T   奧地利 Bender

小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T   美國 Phoenix

mouse Activin A   作用 ：   ELISA   規格 ：   96T

小鼠遊離睾酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Coxsackie virus IgM (Cox V-IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)試劑盒

HumanHirudinELISAKit 人水蛭素(Hirudin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor8-epi-PGF2Alpha(Rabbit8-epi-prostaglandinF2alpha)ELISAKit兔8-異構前列腺素

銀染法細胞端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

MouseMethemoglobin,MHBELISAKit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒規格 ：96T/48T

GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 穀受體2C(多肽)

CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白

GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

NR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C 0.5mgNR2C/NMDAR2C(N-Methyl-d-Asprtate receptor 2C) 穀受體2C(多肽)

CCL27 Protein Human 重組人 CCL27 / CTACK 蛋白

GFRA1重組狗 GFRA1 / GFR alpha-1 蛋白 Protein

GLIPR1 Protein Mouse 重組小鼠 GLIPR1 / RTVP1 蛋白

CA3重組人 Carbonic Anhydrase III / CA3 蛋白 Protein

小鼠輸尿管上皮細胞大鼠凋亡誘導因子(AIF)試劑盒  ，英文名 ： AIF ELISA Kit

Porcine orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 豬食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒

大豆特定基因序列(Lectin)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLTB(HumanlymphotoxinBeta)ELISAKit人淋巴毒素β

體液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次

ELISAKitHSP-20雞熱休克蛋白20

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。