細胞簡介 ：

小鼠視乳頭星形膠質分離自視神經乳頭 ；視乳頭位於黃斑區鼻側附近 ，境界清楚 ，呈白色 、圓盤狀 ，因此也稱為視盤 。視網膜上視覺纖維在此匯集 ，並於此穿出眼球向視中樞傳遞 。視乳頭中央有一小凹陷區 ，稱為視杯或生理凹陷 。視乳頭是視神經纖維聚合組成視神經的起始端 ，它沒有視細胞 ，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點 。視乳頭是開角型青光眼早受損的部位 ，星形膠質細胞是視神經乳頭處主要的膠質細胞類型 ，可為視網膜神經節細胞無髓鞘的軸突提供結構和生物支持 。青光眼視變是位不可逆性致肓眼病 。青光眼視變以視網膜神經節細胞軸突喪失並伴有視乳頭處細胞外基質重坦為主要特征 。導致視網膜神經節細胞喪失的病理生理機製尚未闡明 ，神經膠質細胞對調控神經元微環境起多重作用 ，越來越多的證據表明膠質細胞町能對神經係統發育、損傷 、修複及再生起極為關鍵的作用 。視乳頭星形膠質細胞胞體多扁平 ，體積較大 ，形狀多呈不規則的多邊形 ，突起較粗 ，胞核為橢圓形 ，核仁清晰可見 ，核周有較密集物質 ，胞質稀疏 ，骨架結構良好 ，明顯不同於長梭形的成纖維細胞形態 。

方法簡介 ：

公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質采用-膠原酶聯合消化法 、結合差速貼壁製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠視乳頭星形膠質經GFAP免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)檢測試劑盒 ，英文名 ： 2,3-DPG ELISA Kit

Mouse parathyroid hormone related protein (PTHrP) ELISA Kit 小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)檢測試劑盒

Mouseheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 小鼠熱休克蛋白27(HSP-27)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanProinsulin,PIELISAKit人胰島素原

通用型豬胸膜肺感染(Actinobacilluspleuropneumoniae;App)試劑盒20次

ELISAKiteNOS大鼠內皮型合成酶

CD34重組人 CD34 蛋白 Protein

0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

0脂酶A1(PLA1)重組蛋白 Recombinant Phospholipase A1 (PLA1)

DCN Protein Human 重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白

CD34重組人 CD34 蛋白 Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

INSL4重組人 INSL4 / EPIL 蛋白 Protein

小鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)ELISA 試劑盒 96T/48T

Fro of the human aial naiuretic peptide (Pro-ANP) ELISA Kit 人前心肽(Pro-ANP)檢測試劑盒

HumanUbiquitin,UbELISAKit 人泛素蛋白(Ub)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadrenomedullin,ADM檢測試劑盒人腎上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物mRNA直接化試劑盒10次

MouseActivinA,ACV-AELISAKit小鼠活化素A(ACV-A)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠視乳頭星形膠質細胞小鼠基質金屬蛋白酶抑製因子1(TIMP-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/GelatinaseB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。