① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠腎髒微血管內皮細胞

英文名稱 ：Mouse Renal Microvascular Cells

組織來源 ：腎

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠腎髒微血管內皮分離自腎髒 ；腎髒是小鼠的重要器官 ，它的基本功能是生成尿液 ，借以清除體內代謝產物及某些廢物 、毒物 ，同時經重吸收功能保留水分及其他有用物質 ，如葡萄糖、蛋白質 、氨基酸 、鈉離子 、鉀離子 、等 ，以調節水 、電解質平衡及維護酸堿平衡 。腎髒同時還有內分泌功能 ，生成腎素 、促紅細胞生成素 、活性3 、前列腺素 、激肽等 ，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官 。腎髒的這些功能 ，保證了機體內環境的穩定 ，使新陳代謝得以正常進行 。腎髒內部的結構 ，可分為腎實質和腎盂兩部分 。在腎縱切麵可以看到 ，腎實質分內外兩層 ：外層為皮質 ，內層為髓質 。腎皮質位於腎實質表層 ，富含血管 ，新鮮時呈紅褐色 ，由一百多萬個腎單位組成 。每個腎單位由腎小體和腎小管所構成 ，部分皮質伸展至髓質錐體間 ，成為腎柱 。腎髓質位於腎皮質的深麵 ，血管較少 ，色淡紅 ，為10-20個錐體所構成 。腎錐體在切麵上呈三角形 。錐體底部向腎凸麵 ，向腎門 ，錐體主要組織為集合管 ，錐體稱腎乳頭 ，每一個乳頭有10-20個乳頭管 ，向腎小盞漏鬥部開口。在腎竇內有腎小盞 ，為漏鬥形的膜狀小管 ，圍繞腎乳頭 。腎錐體與腎小盞相連接 。每腎有7-8個腎小盞 ，相鄰2-3個腎小盞合成一個腎大盞 。每腎有2-3個腎大盞 ，腎大盞匯合成扁漏鬥狀的腎盂 。腎盂出腎門後逐漸縮窄變細 ，移行為輸尿管 。腎單位是腎髒結構和功能的基本單位 。腎小體包括腎小球和腎小囊 。腎小體內有一個毛細血管團 ，稱為腎小球 ，腎小球是個血管球 。它由腎動脈分支形成 。腎小球外有腎小囊包繞 。腎小囊分兩層 ，兩層之間有囊腔與腎小管的管腔相通 。腎小管匯成集合管 。若幹集合管匯合成乳頭管 ，尿液由此流入腎小盞 。微血管又稱毛細血管 。分布於各種組織和細胞間的微細的血管 。介於微動脈和微靜脈之間 。平均直徑7-9微米 ，數量極多 ，成網狀分布 。管壁由一層內皮細胞及一薄層基膜組成 ，厚約0.5微米 。基膜外麵有薄層結締組織 ，其中有纖維細胞 、巨噬細胞和周細胞等 。細的毛細血管由一個內皮細胞圍成管腔 ，較粗的毛細血管由2-3個內皮細胞圍成 。分布於肌肉組織 、神經組織和結締組織中的毛細血管 ，內皮細胞間為縫隙連接（縫隙寬150埃） ，稱連續毛細血管 ；分布於內分泌腺 、腎髒等處的毛細血管 ，除有縫隙連接外 ，細胞本身有許多小孔 ，（孔徑800-1000埃） ，稱有孔毛細血管 ；分布於肝 、脾 、骨髓及某些內分泌腺的毛細血管 ，管腔擴大 ，稱血竇 。毛細血管的管壁薄 、通透性大 、管徑細（8-10微米） 、數量多 、血流速度慢 ，這些特點使其成為血液與組織液進行物質交換的場所 ，又稱交換血管 。血竇（sinusoid）由毛細血管管腔擴大而成 ，竇壁的一般結構與毛細血管壁相同 ，由單層內皮細胞構成 ，內皮細胞膜上有窗孔 。不同器官的竇壁結構各有差別 。脾血竇的內皮細胞間有較寬裂隙 ；肝血竇內皮細胞是不連續的 ，有較寬的細胞隙（0.1-0.5微米） ；肝 、脾血竇的基膜不完整或無基膜 ，通透性比毛細血管大 ，較大的蛋白質和血細胞可以通過 。肝血竇壁內有枯否細胞 ，脾血竇內外有巨噬細胞 ，這兩種細胞都有吞噬能力 ，可吞噬清除血液中的異物 、細菌等有害物質 ，是機體單核巨噬細胞係統的重要組成分 。某些內分泌腺的血竇有連續的基膜 。

實驗室分離的小鼠腎髒微血管內皮采用膠原酶消化，結合內皮細胞專用培養基培養篩選製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的小鼠腎髒微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

包被條件 ：PLL（0.1mg/ml） ，明膠（0.1%）

培養基 ：含FBS 、EGF 、bFGF 、IGF 、VEGF 、Heparin 、Hydrocortisone 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態 ：內皮細胞樣

傳代特性 ：可傳2-3代

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

小鼠腎髒微血管內皮體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠能受體β3(ADRβ3)檢測試劑盒  ，英文名 ： ADRβ3 ELISA Kit

Mouse peosidine ELISA Kit (Peosidine) 小鼠戊糖素(Peosidine)檢測試劑盒

RatVitaminK1,VK1ELISAKit 大鼠K1(VK1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHBVpreS2Ag(HumanhepatitisBvirus)ELISAKit人乙型肝病毒前S2抗原

細胞α-L-岩藻糖苷酶(AFU)熒光定量檢測試劑盒20次

swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit豬主要組織相容性複合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)

GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein

DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白

Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)

DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白

CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein

MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白

GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein

小鼠酪蛋白酶檢測試劑盒 96T/48T

Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原(PSA)檢測試劑盒

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人結合蛋白4(RBP-4)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

humanadrencocoicoopichormone,ACTH檢測試劑盒人促腎上腺皮質激素(ACTH)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物DNA甲基轉移酶-1(MET-1)活性酶連續循環比色法定量檢測試劑盒20次

Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂聯素(ADP)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠腎髒微血管內皮細胞小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質裂解素(ST2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質金屬蛋白酶抑製因子4(TIMP-4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠基質金屬蛋白酶抑製因子3(TIMP-3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用，非食用