① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠皮膚肥大細胞

英文名稱 ：Mouse Skin Mast Cells

組織來源 ：皮膚組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠皮膚肥大分離自皮膚組織 ；皮膚肥大細胞廣泛分布於皮膚微血管周圍 ，分泌多種細胞因子 ，參與免疫調節（T細胞 、B細胞 、APC細胞活化） 。皮膚肥大細胞表達MHC分子 、B7分子，具有APC功能 。表達大量的IgE-Fc受體 ，釋放過敏介質 。具有弱吞噬功能 ，和血液的嗜堿粒細胞同樣 ，具有強嗜堿性顆粒的組織細胞 。存在於血液中的這類顆粒 ，含有肝素 、組織胺 、5-羥色胺 ，由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質 ，可在組織內引起速發型過敏反應（炎症） 。由於在肥大細胞上結合的IgE抗體和抗原的接觸 ，使細胞多陷於崩壞 。肥大細胞呈圓形或卵圓形 ，細胞核小 ，呈圓形或橢圓形 ，染色淺 ，位於細胞中央 。細胞常成堆或單個分布於血管附近 。細胞呈圓形或卵圓形 ，細胞質中充滿大小一致 、染成藍紫色的顆粒 ，均勻分布在核周圍 。

公司實驗室分離的小鼠皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠皮膚肥大經MCG-35免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 圓形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)檢測試劑盒  ，英文名 ： NOX1 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子(PDGF)檢測試劑盒

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 大鼠IX(FIX)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGM(HumanGasicMucin)ELISAKit人胃粘液素

細胞繁殖與毒性高通量篩選熒光檢測試劑盒500次

RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質受體(SP-R)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子 (抗原)

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細胞生長因子-7/纖維母細胞生長因子 (抗原)

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Glucose depende insulin releasing polypeptide (GIP) ELISA Kit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測試劑盒

Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit 人生長相關蛋白43(GAP-43)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanactivatinganscriptionfactor-1,ATF-1檢測試劑盒人轉錄因子抗體-1(ATF-1)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

脂質過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次

MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit小鼠血管生成素4(ANG-4)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠皮膚肥大細胞小鼠巨嗜細胞性蛋白-1(mouse MIP-1)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠巨嗜細胞性蛋白-2(mouse MIP-2)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠巨嗜細胞性蛋白-3a(mouse MIP-3a)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠巨嗜細胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β)   作用 ：   ELISA   規格：      進口分裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用