細胞簡介 ：

小鼠胚肝間充質幹分離自胚胎肝組織 ；肝髒是身體內以代謝功能為主的一個器官 ，並在身體裏麵起著去氧化 、儲存肝糖 、分泌性蛋白質的合成等作用 ；肝髒也製造消化係統中之膽汁。肝髒是機體內髒裏大的器官 ，位於機體中的腹部位置 ，在右側橫隔膜之下 ，位於膽囊之前端且於右邊腎髒的前方，胃的上方。肝髒是機體消化係統中大的消化腺 ，為一紅棕色的V字形器官 。肝髒是尿素合成的主要器官 ，又是新陳代謝的重要器官 。間充質幹細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的幹細胞 。在不同的誘導條件下 ，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞 ，並具有造血支持 、免疫調節 、組織修複等作用 。間充質幹細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體幹細胞 ，存在於骨髓 、脂肪組織 、臍血及多種胎兒組織 。它可分泌多種細胞因子及生長因子 ，促進造血幹細胞（HSC）的增殖與分化 。MSCs還具有免疫調節 、抗炎和組織修複作用 ，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關並發症 。胚胎肝非實質細胞中含有MSC ，且量較大 ，可成為種子細胞 。

方法簡介 ：

實驗室分離的小鼠胚肝間充質幹采用-膠原酶聯合消化法製備而來 ，細胞總量約為5×10⁵cells/瓶 。

質量檢測

實驗室分離的小鼠胚肝間充質幹經CD44免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養信息 ：

培養基 ：含FBS 、EGF 、bFGF 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 ：每2-3天換液一次

生長特性 ：貼壁

細胞形態 ：成纖維細胞樣

傳代特性 ：可傳3代左右

消化液 ：0.25%

培養條件 ：氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

小鼠胚肝間充質幹體外培養周期有限 ；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養 ，以此保證該細胞的佳培養狀態 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠內皮素轉化酶1(ECE1)檢測試劑盒  ，英文名 ： ECE1 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor soluble receptor alpha (PDGFsR- alpha) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)檢測試劑盒

Ratthyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGlp-1ELISAKit大鼠胰高血糖素樣肽1

細胞脯(proline)含量比色法定量檢測試劑盒20次

Ratsolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKit大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sAIL)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

COLEC12重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein

GPA33(glycoprotein A33 transmembrane 0.5mgGPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原

IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein

CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白

OMG Protein Mouse 重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽)

GPA33(glycoprotein A33 transmembrane 0.5mgGPA33(glycoprotein A33 transmembrane) 糖蛋白A33(跨膜)抗原

CXCL10 Protein Human 重組人 CXCL10 / Crg-2 蛋白

COLEC12重組大鼠 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein

OMG Protein Mouse 重組小鼠 OMGP / OMG 蛋白 (aa 1-245, His 標簽)

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小鼠卵巢癌標誌物CA125ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glucose oxidase (GOD) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶(GOD)檢測試劑盒

HumanCyclicAMPresponseelemebindingprotein,CREBELISAKit 人cAMP反應元件結合蛋白(CREB)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanactivatedproteinCresistance,APCR檢測試劑盒人活化蛋白C抵抗素(APCR)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

脂質過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次

MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉化酶(ACE)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠胚肝間充質幹細胞小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。