① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

小鼠毛囊分離自皮膚毛囊組織 ；毛囊是表皮細胞連續形成的袋樣上皮 。其基底是真皮凹進的真皮毛乳頭 ，中心是一根毛發 ，立毛肌的一側斜附在毛囊壁上 ，附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸 ，毛囊在皮膚表麵的開口是毛囊孔 。毛囊位於真皮和皮下組織中 ，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度 ，它是由包繞毛發與表皮相連的上皮鞘 ，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結構比較複雜的器官附件組織 。毛囊實際上是由結締組織和上皮兩部分所組成 ，除了具有結締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外 ，毛囊其餘部分都是由表皮細胞分化而來 。毛囊開口起始於皮膚表麵 ，而每個毛囊又和一個或多個腺胞相連 。每個腺胞解離成富含脂質的物質 ，卻又通過一個共同和毛囊相通連的皮脂腺導管將分泌物運送到皮膚表麵排出 。

公司實驗室分離的小鼠毛囊采用-膠原酶聯合消化法製備而來製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠毛囊經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 梭形 、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠硫氧還蛋白還原酶1(xR1)檢測試劑盒  ，英文名 ： xR1 ELISA Kit

Mouse proinsulin (PI) ELISA Kit 小鼠胰島素原(PI)檢測試劑盒

RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit 大鼠超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGDH/GLDH(HumanGlamatedehydrogenase)ELISAKit人穀脫氫酶

細胞元素熒光定量檢測試劑盒20次

RatsecretedphospholipaseA2,sPLA2ELISAKit大鼠分泌型0脂酶A2(sPLA2)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)

KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein

CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白

CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)

Cecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽 0.5mgCecropin 抗菌肽/天蠶素(多肽)

CTSD Protein Human 重組人 Cathepsin D / CTSD 蛋白

PDCD1重組小鼠 PD1 / PDCD1 蛋白 Protein

CD226 Protein Mouse 重組小鼠 CD226 / DNAM-1 蛋白 (His & Fc 標簽)

KYNU重組人 KYNU / Kynureninase 蛋白 Protein

小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human tetanus aibody (Tetanus Ab) ELISA Kit 人破傷風抗體(Tetanus Ab)檢測試劑盒

Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 人脂肪酸結合蛋白(FABP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAcetylcholinesterase,AChE檢測試劑盒人乙酰酯酶(AChE)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠毛囊細胞小鼠抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠鐵蛋白(FE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠酶2(CA-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用