① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：小鼠角膜成纖維細胞

英文名稱 ：Mouse Corneal Fibroblast Cells

組織來源 ：眼角膜組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠角膜成纖維分離自眼角膜組織 ；角膜位於眼球前壁的一層透明膜 ，約占纖維膜的前1/6 ，從後麵看角膜呈正圓形 ，從前麵看為橫橢圓形 。角膜厚度各部分不盡相同 ，中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢 ，如有外物接觸角膜 ，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛 。為了保持透明 ，角膜並沒有血管，透過外界空氣 、淚液及房水獲取養份及氧氣 。角膜分為五層 ，由前向後依次為 ：上皮細胞層 、前彈力層 、基質層 、後彈力層 、內皮細胞層。成纖維細胞（Fibroblast）是疏鬆結締組織的主要細胞成分 ，由胚胎時期的間充質細胞分化而來 。成纖維細胞較大 ，輪廓清楚 ，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構 ，其細胞核呈規則的卵圓形 ，核仁大而明顯 。成纖維細胞功能活動旺盛 ，細胞質嗜弱堿性 ，具明顯的蛋白質合成和分泌活動 ，在一定條件下 ，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化 ；成纖維細胞對不同程度的細胞變性 、壞死和組織缺損的修複有著十分重要的作用 。剛分離的角膜成纖維細胞呈圓形 、折光性良好 ，懸浮於培養基中 。30min細胞貼壁 ，其中部分開始伸出偽足 ，表現為小的突起 ；6h後細胞基本貼壁 ，伸展成梭形 ，胞核清晰 ，分布較均勻 ，散在生長 ，不聚集成團 ；細胞生長迅速 ，5-7天即呈融合狀態 ，細胞排列緊密 ，有的交叉重疊生長 ，平坦 、胞體較大 ，細胞質透明 ，細胞核較大 ，呈橢圓形 ，顏色淡 。細胞融合 ，並彼此連接成網狀 ；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布 。角膜成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括 ：構造和維持角膜的正常形態 ，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷後及時大量聚集修複損傷組織 。

公司實驗室分離的小鼠角膜成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法製備而來 ，細胞總量約為5×10?cells/瓶 。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠角膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定 ，純度可達90%以上 ，且不含有HIV-1 、HBV 、HCV 、支原體 、細菌 、酵母和真菌等 。

培養基 含FBS 、生長添加劑 、Penicillin 、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相 ：空氣 ，95% ；CO2 ，5%

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層 ，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法 。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠促甲狀腺素(TSH)檢測試劑盒  ，英文名 ： TSH ELISA Kit

Mouse collagen type N N-terminal peptide (X) ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)檢測試劑盒

ELISA 小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)  進口分裝

CLIAKitforLH(Mouseleoopichormone)ELISAKit小鼠促黃體激素

通用型HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

ELISAKitAChRab乙酰受體抗體

GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) Protein

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 0.5mgTie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪激酶2抗原

CD74重組人 CD74 蛋白 Protein

FZD4 Protein Human 重組人 Frizzled-4 / FZD4 / CD344 蛋白 (Fc 標簽)

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標簽)

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 0.5mgTie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域酪激酶2抗原

FZD4 Protein Human 重組人 Frizzled-4 / FZD4 / CD344 蛋白 (Fc 標簽)

GP120重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) Protein

LEFTY2 Protein Human 重組人 Lefty2 / Lefty A 蛋白 (Fc 標簽)

CD74重組人 CD74 蛋白 Protein

小鼠補體1抑製物抗體(C1INH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human glycogen phosphorylase MM (GP-MM) ELISA Kit 人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)檢測試劑盒

HumanproteinkinaseB,PKBELISAKit 人蛋白激酶B(PKB)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-Ⅱ檢測試劑盒人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20次

HumanStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit人幹細胞因子受體(SCFR)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

小鼠角膜成纖維細胞兔子胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子胰島素(INS)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用