老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔终板软骨细胞

英文名称

：Rabbit Endplate Chondrocyte Cells

组织来源

：椎间盘

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔终板软骨分离自椎间盘终板软骨组织
；椎体终板是椎体在生长发育过程中，椎体上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈轻度凹陷
，即为骨性终板。椎体终板的中央仍为一薄层透明软骨覆盖，并终生存在
，即为软骨终板
，上下软骨终板与髓核和纤维环连接共同构成椎间盘。椎体终板构成了椎间盘的上下边界，位于椎体中心的松质骨和椎间盘之间。是由软骨下骨和厚度相当的覆盖其上的软骨组成。主要作用是防止椎间盘髓核组织嵌入椎体
，同时具有平衡分散应力的作用

。成熟的终板软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内，这些终板软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下
，终板软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，终板软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的终板软骨细胞对于研究其生理功能

、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义
。

实验室分离的兔终板软骨采用胶原酶-联合消化并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔终板软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1

、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等

。

培养基
：含FBS
、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每3-4天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液：0.25%

培养条件
：气相
：空气，95%；CO2

，5%

兔终板软骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态
。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠17-酮类固醇(17-KS)检测试剂盒 ，英文名： 17-KS ELISA Kit

Mouse thyroid peroxidase (TPO) ELISA Kit 小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)检测试剂盒

MousecrosslinkedN-telopeptideoftypeⅠcollagen,XELISAKit 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(X)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanpreptinELISAKit人preptin

通用型猪圆环病毒(CIRCOVIRUS)试剂盒20次

ELISAKitET-1大鼠内皮素1

CCL17重组食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 Protein

Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原 0.5mgMetal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原)

PDE9A重组人 PDE9A 蛋白 Protein

COMMD9 Protein Human 重组人 COMMD9 蛋白

TIGIT Protein Mouse 重组小鼠 TIGIT / VSTM3 蛋白 (Fc 标签)

Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原 0.5mgMetal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白(抗原)

COMMD9 Protein Human 重组人 COMMD9 蛋白

CCL17重组食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 Protein

TIGIT Protein Mouse 重组小鼠 TIGIT / VSTM3 蛋白 (Fc 标签)

PDE9A重组人 PDE9A 蛋白 Protein

小鼠三0酸腺苷(ATP)检测试剂盒 96T/48T

Human endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)检测试剂盒

Humanbeta2glycoprotein,β2-GPELISAKit 人β2糖蛋白(β2-GP)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPig50%complemehemolysis,CH50检测试剂盒豚鼠血清总补体(CH50)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量检测试剂盒20次

MouseClaracellprotein,CC16ELISAKit小鼠克拉拉细胞蛋白(CC16)检测试剂盒规格：96T/48T

兔终板软骨细胞小鼠Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠Ⅱ(FⅡ)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠受体()检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠抗复合物(TAT)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用