老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离
，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔真皮微血管内皮细胞

英文名称

：Rabbit Dermal Microvascular Endothelial Cells

组织来源
：皮肤

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔真皮微血管内皮分离自真皮组织；真皮
，位于表皮深层，向下与皮下组织相连
，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维

，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质
。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长
、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞
、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限
。

实验室分离的兔真皮微血管内皮采用胶原酶-混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔真皮微血管内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV
、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

包被条件
：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性
：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性
：可传2-3代

消化液
：0.25%

培养条件：气相


：空气，95%
；CO2

，5%

兔真皮微血管内皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1

、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散

，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠17-α(17-αMT)检测试剂盒 ，英文名
： 17-αMT ELISA Kit

Mouse thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 小鼠甲状腺素抗体(TAb)检测试剂盒

MouseBonemorphogeneticprotein6,BMP-6ELISAKit 小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit人血小板衍生生长因子

通用型总淀粉+直链+支链淀粉比色法定量检测试剂盒20次

ELISAKitET大鼠内毒素

NP重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP Protein

phospho-BAD(pSer128 0.5mgphospho-BAD(pSer128) 0酸化相关死亡促进因子抗体

HYOU1重组人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白 Protein

COL9A1 Protein Human 重组人 COL9A1 蛋白 (Fc 标签)

CPE Protein Human 重组人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 标签)

phospho-BAD(pSer128 0.5mgphospho-BAD(pSer128) 0酸化相关死亡促进因子抗体

COL9A1 Protein Human 重组人 COL9A1 蛋白 (Fc 标签)

NP重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) Nucleocapsid / NP Protein

CPE Protein Human 重组人 Carboxypeptidase E / CPE 蛋白 (Fc 标签)

HYOU1重组人 ORP150 / HYOU1 / HSP12A 蛋白 Protein

小鼠上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human terminal compleme complex C5b-9 (TCC C5b-9) ELISA Kit 人末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)检测试剂盒

HumanPeptideγ,PγELISAKit 人γ肽(Pγ)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

GoatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPK检测试剂盒山羊0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)检测试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母0酸葡萄糖异构酶(phosphoglucoseisomerase;GPI)活性光谱法定量检测试剂盒20次

MouseClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit小鼠CD30分子(CD30)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔真皮微血管内皮细胞小鼠检测试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠试剂盒，规格型号：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名

：小鼠试剂盒、小鼠检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

小鼠牛血清白蛋白检测试剂盒   小鼠牛血清白蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠牛血清白蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠牛血清白蛋白试剂盒、小鼠牛血清白蛋白检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月

。

小鼠牛小肠碱性0酸酶检测试剂盒   小鼠牛小肠碱性0酸酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠牛小肠碱性0酸酶试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠牛小肠碱性0酸酶试剂盒、小鼠牛小肠碱性0酸酶检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月。

小鼠检测试剂盒   小鼠试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠试剂盒
，规格型号
：96T/48T

，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠试剂盒、小鼠检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁

。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用