老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法

。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：兔骨髓基质细胞

英文名称：Rabbit Bone Marrow Stromal Cells

组织来源
：骨髓

产品规格

：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔骨髓基质分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓
。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官
，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨
、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织
，能产生血细胞的骨髓略呈红色
，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔
，随着年龄增大，脂肪细胞增多
，相当部分红骨髓被黄骨髓取代
，后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓基质细胞是一类具有多向分化潜能的干细胞，其中部分细胞有自我复制、高度增殖和多向分化能力

，在特定培养条件下可向骨
、软骨、神经胶质细胞
、心肌、骨胳肌、脂肪细胞、血管内皮细胞等间叶组织细胞转化

。骨髓基质细胞在自然条件下主要分化为成骨细胞，在不同的培养条件下其分化途径不同，其在成骨细胞与成脂细胞分化之间呈反向变化
。

实验室分离的兔骨髓基质采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔骨髓基质经CD90免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV

、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基：含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态
：成纤维细胞样

传代特性：可传5代左右；3代以内状态佳

消化液
：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2
，5%

兔骨髓基质体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状

，此时再采用机械法

，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠Ⅸ型胶原α1(COL9α1)检测试剂盒 ，英文名
： COL9α1 ELISA Kit

Human vanillylmandelic acid (VMA) ELISA Kit 人垂草扁桃酸(VMA)检测试剂盒

GoatIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 山羊白介素2受体(IL-2R)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforC3a(MouseComplemefragme3a)ELISAKit小鼠补体片断3a

细菌钙镁ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量检测试剂盒20次

RabbitThrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit兔纤溶抑制因子/激活的纤溶抑制物(TAFI)检测试剂盒规格
：96T/48T

TNFSF15重组大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 标签) Protein

GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA 0.5mgGABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基A型受体α1抗原

CD276重组人 B7-H3 / CD276 蛋白 Protein

IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158)

REG4 Protein Mouse 重组小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白

GABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA 0.5mgGABRA1(gamma-aminobutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1) γ1氨基A型受体α1抗原

IL36A Protein Human 重组人 IL1F6 / IL36 蛋白 (aa 6-158)

TNFSF15重组大鼠 TNFSF15 / TL1A 蛋白 (Fc 标签) Protein

REG4 Protein Mouse 重组小鼠 REG4 / GISP / RELP 蛋白

CD276重组人 B7-H3 / CD276 蛋白 Protein

豚鼠端粒酶(TE)检测试剂盒
，英文名： TE ELISA Kit

Human dopamine D1 receptor (D1R) ELISA Kit 人多巴胺D1受体(D1R)检测试剂盒

Rabbitsolubleadhesionmolecules,SamELISAKit 兔子可溶性粘附分子(Sam)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-TGELISAKit大鼠β血小板球蛋白/β血栓环蛋白

细菌同化型盐还原酶活性比色法定量检测试剂盒20次

rabbitInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)检测试剂盒规格
：96T/48T

兔骨髓基质细胞人转化生长因子α(TGF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

人干细胞因子受体(SCFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月

。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用