老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞
，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：兔肝动脉内皮细胞

英文名称：Rabbit Hepatic Artery Endothelial Cells

组织来源：肝动脉

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔肝动脉内皮分离自肝动脉组织；在胚胎期，肝脏有3条动脉供血，分别来源于胃左动脉、腹腔动脉和肠系膜上动脉，这3条动脉分别的不同部位。出生后
，一般保留一条动脉，大部分为起源于腹腔动脉的动脉
，由其分出左
、右肝动脉供应左
、右半肝。偶尔也可见起源于胃左动脉的动脉或起源于肠系膜上动脉的动脉。但也有2条动脉并存的情况，如起源于腹腔动脉和起源于胃左动脉（25%）
，起源于腹腔动脉和起源于肠系腊上动脉（10%），而起源于胃左动脉和起源于肠系膜上动脉的2条动脉同时存在的情况比较少见。此外，还有5%像胚胎期一样
，3条动脉同时存在。这种起源于腹腔动脉以外的肝动脉称为迷走肝动脉

，如果肝脏没有起源于腹腔动脉的动脉供血时，此种异位起源的肝动脉称替代动脉，如果在常见肝动脉类型外
，还有一支这种异位起始的动脉的一部分血流，这种肝动脉称副肝动脉。肝动脉内皮细胞是衬于肝动脉内表面的单层扁平上皮，在炎症时高表达黏附分子，与血流中白细胞表面黏附分子相互作用，从而介导白细胞穿越血管壁
，亦属一类非专职抗原提呈细胞。它们吞噬异物、细菌
、坏死和衰老的组织，还参与集体免疫活动
，包括：①血管收缩及血管舒张，从而控制血压；②凝血（血栓形成及纤维蛋白溶解）；③动脉硬化；④血管生成
；⑤炎症及肿胀（浮肿）；⑥内皮细胞亦控制一些物质
，如白血球进出血管

。

实验室分离的兔肝动脉内皮采用混合酶消化法结合差速贴壁法
，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的兔肝动脉内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

包被条件：PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率
：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：内皮细胞样

传代特性：可传2-3代

消化液：0.25%

培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%

兔肝动脉内皮体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠促肾上皮质激素释放激素(CRH)检测试剂盒 ，英文名： CRH ELISA Kit

Mouse 17 hydroxycoicosteroid (17-OHCS) ELISA Kit 小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)检测试剂盒

ELISA 小鼠脑肽(mouse BNP)  进口分装

CLIAKitforLIFELISAKit大鼠白血病抑制因子

通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次

ELISAKitAflatoxin霉毒素

GHR重组大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

TFRC重组人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

IFNB1 Protein Human 重组人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

IL10RB Protein Mouse 重组小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 标签)

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

IFNB1 Protein Human 重组人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

GHR重组大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

IL10RB Protein Mouse 重组小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 标签)

TFRC重组人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

小鼠1,4,5-三0酸肌醇(IP3)检测试剂盒 96T/48T

Rat cardioophin 1 (CT-1) ELISA Kit 大鼠心肌营养素1(CT-1)检测试剂盒

Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit 人反三甲状腺原(3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanC-Polypeptide,CP检测试剂盒人C多肽(CP)检测试剂盒规格：96T/48T

组织CSF1R激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

HumanProteinCELISAKit人蛋白C(ProteinC)检测试剂盒规格：96T/48T

兔肝动脉内皮细胞天青B   1g

AzureB   5g

  50KU

Baciacin   250KU

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用