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① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞

、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养

，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用

。

产品名称：兔肠系膜平滑肌细胞

英文名称：Rabbit Mesenteric Smooth Muscle Cells

组织来源：肠系膜

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

兔肠系膜平滑肌分离自肠系膜动脉组织；肠道指的是从胃幽门至门的消化管

。肠是消化管中长的一段
，也是功能重要的一段。哺乳动物的肠包括小肠
、大肠和直肠3大段。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的
，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便
，再通过直肠经门排出体外。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化
、吸收食物
，以提供足够的养分
，其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。肠系膜动脉由背大动脉发出的走行在肠系膜内，分布于消化管的动脉
。分成肠系膜上动脉和肠系膜下动脉
。前者主要分布于小肠左侧，后者分布于结肠
、大肠、泄殖腔等处
。肠动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一

，呈梭形
、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形
、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形


，胞浆丰富
，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长
，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状
；密度高时


，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，3大段
。大量的消化作用和几乎全部消化产物的吸收都是在小肠内进行的，大肠主要浓缩食物残渣，形成粪便，再通过直肠经门排出体外
。肠道堪称身体劳累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足够的养分，其实它的功能还远不止此——它还是机体内大的微生态系统。肠系膜动脉由背大动脉发出的走行在肠系膜内
，分布于消化管的动脉。分成肠系膜上动脉和肠系膜下动脉。前者主要分布于小肠左侧，后者分布于结肠、大肠、泄殖腔等处。肠动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后

，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形
、不规则形、三角形或扇形
，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富
，有分枝状突起
，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长
，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状

；密度高时
，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合
，并保持上述形态学特征和生长特点

。

实验室分离的兔肠系膜平滑肌采用-胶原酶联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶
。

质量检测

实验室分离的兔肠系膜平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌
、酵母和真菌等。

培养基
：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性
：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件
：气相：空气
，95%
；CO2
，5%

兔肠系膜平滑肌体外培养周期有限
；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的佳培养状态。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2

、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料

，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层

，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后
，细胞容易贴壁生长。

大鼠转化生长因子β3(TGFβ3)检测试剂盒 ，英文名： TGFβ3 ELISA Kit

Mouse ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 小鼠抗心0脂抗体IgG(ACA-IgG)检测试剂盒

Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanLactoferrin,LTF/LFELISAkit人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白

微粒体S转移酶(GSHST)活性比色法定量检测试剂盒20次

大鼠抗IVIgG抗体ELISAKit大鼠抗IVIgG抗体ELISAKit，大鼠抗IVIgG抗体ELISAKit，

FGFR3重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴细胞衰减蛋白(抗原)

VSTM1重组人 VSTM1 蛋白 (Fc 标签) Protein

HGF Protein Human 重组人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

PDCD1LG2 Protein Rat 重组大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

CD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator 0.5mgCD272/BTLA(B and T lymphocyte attenuator) B 和 T 淋巴细胞衰减蛋白(抗原)

HGF Protein Human 重组人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白

FGFR3重组小鼠 FGFR3 / CD333 蛋白 Protein

PDCD1LG2 Protein Rat 重组大鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白

VSTM1重组人 VSTM1 蛋白 (Fc 标签) Protein

小鼠P53(P53-ab)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat glycogen syhase kinase (GSK) ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)检测试剂盒

HumanEsiol,E3ELISAKit 人雌三醇(E3)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancoagulationfactorⅨ,FⅨ检测试剂盒人Ⅸ(FⅨ)检测试剂盒规格
：96T/48T

组蛋白脱乙酰化酶9(HDAC9)活性比色法定量检测试剂盒20次

humaesistinELISAKit人抵抗素(Resistin)检测试剂盒规格：96T/48T

兔肠系膜平滑肌细胞兔去甲上腺素检测试剂盒   兔去甲上腺素试剂盒   规格型号
：96T/48T   兔去甲上腺素试剂盒，规格型号
：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔去甲上腺素试剂盒、兔去甲上腺素检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期
：6个月。

兔前列腺素F2a检测试剂盒   兔前列腺素F2a试剂盒   规格型号

：96T/48T   兔前列腺素F2a试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔前列腺素F2a试剂盒、兔前列腺素F2a 检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期
：6个月。

兔前列腺素E2检测试剂盒   兔前列腺素E2试剂盒   规格型号：96T/48T   兔前列腺素E2试剂盒，规格型号
：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：兔前列腺素E2试剂盒
、兔前列腺素E2 检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

兔前列腺素E1检测试剂盒   兔前列腺素E1试剂盒   规格型号：96T/48T   兔前列腺素E1试剂盒，规格型号
：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：兔前列腺素E1试剂盒、兔前列腺素E1 检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的
，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗

，非药用
，非食用