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① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁
，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞

，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：人肾成纤维细胞

英文名称
：Human Renal Fibroblast Cells

组织来源：肾组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人肾成纤维分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液
，借以清除体内代谢产物及某些废物
、毒物
，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质
，如葡萄糖
、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水
、电解质平衡及维护酸碱平衡
。肾脏同时还有内分泌功能
，生成肾素、促红细胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚
，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动
，在一定条件下

，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损以及骨创伤的修复有着十分重要的作用。肾成纤维细胞是肾脏结缔组织中重要的细胞类型，在体外培养中
，一般大致成梭形
、多角形或不规则形等，为贴壁生长型细胞。刚分离的肾成纤维细胞呈圆形、折光性良好
，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁
，伸展成梭形
，胞核清晰，分布较均匀
，散在生长

，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密
，有的交叉重叠生长
，平坦
、胞体较大
，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形
，颜色淡
。细胞融合
，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布
。其主要功能有：①组成过滤屏障内壁的重要部分
；②在炎症和致血栓物质的刺激合成必要的生物活性分子；③受损后影响系膜细胞和上皮细胞，进而影响肾脏病变。

公司实验室分离的人肾成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来

，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人肾成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV
、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

培养基 含FBS

、生长添加剂
、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右
；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%
；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞

。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织


。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后
，细胞容易贴壁生长

。

大鼠促甲状腺素受体(TSHR)检测试剂盒 
，英文名
： TSHR ELISA Kit

Mouse 17- Ketosteroid (17-KS) ELISA Kit 小鼠17-酮类固醇(17-KS)检测试剂盒

ELISA 小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)  进口分装

CLIAKitforLHRH(HumanLeinizingHormone-ReleasingHormone)ELISAKit人黄体生成素释放激素

通用型HCV亚型(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR扩增检测试剂盒(1a
、1b
、2a
、2b、3a、3b)20次

ELISAKitPNA花生凝集素

CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签) Protein

克拉拉细胞蛋白16(CC16)重组蛋白 Recombinant Clara Cell Protein 16 (CC16)

MSRB3重组人 MSRB3 蛋白 Protein

IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 (Fc 标签)

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

克拉拉细胞蛋白16(CC16)重组蛋白 Recombinant Clara Cell Protein 16 (CC16)

IFNAR2 Protein Human 重组人 IFNAR2 / IFNABR 蛋白 (Fc 标签)

CCL1重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白 (Fc 标签) Protein

HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

MSRB3重组人 MSRB3 蛋白 Protein

小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)检测试剂盒

Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanC-Peptide检测试剂盒人C肽(C-Peptide)检测试剂盒规格：96T/48T

组织CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性检测试剂盒20次

Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit人蛋白质二硫键异构酶(PDI)检测试剂盒规格：96T/48T

人肾成纤维细胞调节活化蛋白   英文名称：   Human Raes   规格：      英文缩写：   RAES

活性氧   英文名称：   Human Reactive Oxygen Species   规格：      英文缩写

：   ROS

胰腺再生蛋白1a   英文名称
：   Human Regenerating Islet Derived Protein 1a   规格
：      英文缩写
：   REG1a

再生胰岛衍生蛋白   英文名称：   Human Regenerating Islet Derived Protein   规格：      英文缩写：   REG

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁

。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用