老哥俱乐部

细胞简介：

人神经星形胶质分离自脑组织；大脑分左右两个半球
，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方
。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面
，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶
、颞叶、枕叶四大部分。神经星形胶质细胞

，是哺乳动物脑内分布广泛的一类细胞，也是胶质细胞中体积大的一种。用经典的金属浸镀技术（银染色）显示此类胶质细胞呈星形
，从胞体发出许多长而分支的突起
，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间
，起支持和分隔神经细胞的作用

。细胞突起的末端常膨大形成脚板或称终足，有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上，因此这些脚板又被称为血管足或血管周足，靠近脑脊髓表面的脚板则附着在软膜内表面，彼此连接构成胶质界膜。细胞刚分离时呈圆形，24h后大部分细胞贴壁
，均匀分布于瓶底，部分细胞伸出细小突起
，培养4-5d后细胞数量明显增多，呈扁平、多角形
，胞质丰富且核浆较少
，细胞核呈椭圆形，偏于胞体一侧
。神经星形胶质细胞是中枢神经系统的重要细胞组成，不仅具有支持功能，还能够合成及分泌多种神经活性物质，在维持神经元内外环境
、生存、迁移、免疫调节、信号转导
、轴突生长及功能整合等方面具有重要作用。

方法简介
：

公司实验室分离的人神经星形胶质采用酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的人神经星形胶质经GFAP免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形
、多角形

传代特性 可传3代左右

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2
，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次

，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次
，直至组织被消化
；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬

，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定

：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基

，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次
，每次10min

，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

小鼠乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒

Human visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 人内脂素/内脏脂肪素(visfatin)检测试剂盒

HumanSurfactaProteinD,SP-DELISAKit 人表面活性蛋白D(SP-D)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

guineapighepatocytegrowthfactor,HGF检测试剂盒豚鼠肝细胞生长因子(HGF)检测试剂盒规格
：96T/48T

真菌/酵母细胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量检测试剂盒20次

MouseCeruloplasmin,CP/CERELISAKit小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)检测试剂盒规格：96T/48T

CDH1重组小鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein

A/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine 0.5mgA/H1N1-M2 Swine(Avian influenza Matrix Protein-2 Swine) A型猪流感病毒H1N1-M2蛋白

USP46重组人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 标签) Protein

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

EFNB1 Protein Rat 重组大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)

蛋白激酶Cδ(PKCδ)重组蛋白 Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

IL21R Protein Human 重组人 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白

DDR1重组小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His & GST 标签) Protein

FGFR4 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白 (Fc 标签)

AHSP重组人 AHSP / ERAF 蛋白 Protein

豚鼠坏死因子α(TNF-α)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human peosidine ELISA Kit (Peosidine) 人戊糖素(Peosidine)检测试剂盒

HumanBeta-Endorphieceptor,β-EPRELISAKit 人β内啡肽受体(β-EPR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanCross-linkedCarboxy-terminaltelopeptideoftypeⅠcollagen,ⅠCTP检测试剂盒人Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(ⅠCTP)检测试剂盒规格：96T/48T

组织D-葡萄糖激酶法定量检测试剂盒20次

HumanProstaglandinE2，PG-E2ELISAKit人前列腺素E2(PGE2)检测试剂盒规格
：96T/48T

人神经星形胶质细胞人总铁结合力（TIBC）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人总前列腺特异抗原(tPSA)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

人总蛋白（TP）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态

，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用

。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。