老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长

。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人肺动脉成纤维细胞

英文名称：Human Pulmonary Artery Fibroblast Cells

组织来源：肺动脉组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

人肺动脉成纤维分离自肺动脉组织；肺动脉亦称肺动脉干
。在呼吸空气的脊椎动物中，把静脉血由心脏导向肺脏的动脉。肺大动脉起于右心室
，在主动脉之前向左上后方斜行，在主动脉弓下方分为左、右肺动脉，经肺门入肺。肺动脉干位于心包内，为一粗短的动脉干
。起自右心室，在升主动脉前方向左后上方斜行，至主动脉弓下方分为左
、右肺动脉。左肺动脉较短
，在左主支气管前方横行
，分二支进入左肺上
、下叶
。右肺动脉较长而粗，经升主动脉和上腔静脉后方向右横行，至右肺门处分为三支进入右肺上
、中、下叶
。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来

；成纤维细胞较大，轮廓清楚
，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构
，其细胞核呈规则的卵圆形
，核仁大而明显
。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性
，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的肺动脉成纤维细胞呈圆形
、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁
，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰
，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长
，平坦
、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合
，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。肺动脉成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括
：构造和维持肺动脉的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织
。

公司实验室分离的人肺动脉成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的人肺动脉成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1
、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养

。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟
。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

大鼠Toll样受体2(TLR2)检测试剂盒 ，英文名： TLR2 ELISA Kit

People 6 galactose sulfatase (Gal-6S) ELISA Kit 人半乳糖6酯酶(Gal-6S)检测试剂盒

Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 鸡促卵泡素(FSH)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCCP(Humancomplemeconolprotein)ELISAKit人补体调节蛋白

细胞组织型纤维蛋白溶酶原激活剂(tPA)活性化学发光法定量检测试剂盒20次

RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit大鼠血管紧张素转化酶(ACE)检测试剂盒规格
：96T/48T

TNFRSF1B重组小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein

ATF6(activating transcription factor 6 0.5mgATF6(activating transcription factor 6) 活化转录因子6抗原

GDNF重组人 GDNF 蛋白 Protein

CDKL2 Protein Human 重组人 CDKL2 蛋白

KDR Protein Rat 重组大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 标签)

ATF6(activating transcription factor 6 0.5mgATF6(activating transcription factor 6) 活化转录因子6抗原

CDKL2 Protein Human 重组人 CDKL2 蛋白

TNFRSF1B重组小鼠 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 Protein

KDR Protein Rat 重组大鼠 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 蛋白 (Fc 标签)

GDNF重组人 GDNF 蛋白 Protein

小鼠3(VD3)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat osteopoin (OPN) ELISA Kit 大鼠骨桥素(OPN)检测试剂盒

HumanlumicanELISAKit 人基膜聚糖(lumican)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin9,IL-9检测试剂盒鸡白介素9(IL-9)检测试剂盒规格
：96T/48T

载玻片细胞INSULI-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测试剂盒规格
：96T/48T

人肺动脉成纤维细胞小鼠细胞色素检测试剂盒   小鼠细胞色素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠细胞色素试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源
：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠细胞色素试剂盒、小鼠细胞色素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白检测试剂盒   小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白试剂盒、小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

小鼠羟脯酸检测试剂盒   小鼠羟脯酸试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠羟脯酸试剂盒
，规格型号
：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：小鼠羟脯酸试剂盒、小鼠羟脯酸eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期
：6个月

。

小鼠凝溶胶蛋白检测试剂盒   小鼠凝溶胶蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠凝溶胶蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T
，来源
：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名：小鼠凝溶胶蛋白试剂盒
、小鼠凝溶胶蛋白eisa试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月。

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月

。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁

。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用