老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化
，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称
：鸡软骨细胞

英文名称

：Chicken Chondrocyte Cells

组织来源：软骨

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

鸡软骨分离自软骨组织；软骨组织由软骨细胞
、基质及纤维构成
。软骨组织再生能力强，这些增生的幼稚细胞形似纤维母细胞，以后逐渐变为软骨母细胞
，并形成软骨基质
，细胞被埋在软骨陷窝内而变为静止的软骨细胞。根据软骨组织内所含纤维成分的不同
，可将软骨分为透明软骨
、弹性软骨和纤维软骨三种，其中以透明软骨的分布较广，结构也较典型
。软骨细胞（chondrocyte）位于软骨陷窝内
。幼稚的软骨细胞位于软骨组织的表层，单个分布
，体积较小
，呈椭圆形
，长轴与软骨表面平行

，越向深层的软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形
，染色浅，细胞质弱嗜碱性

，常见数量不一的脂滴。成熟的软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内
，这些软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成
，称为同源细胞群

。电镜下，软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体
。在组织切片中，软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的软骨细胞对于研究其生理功能
、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义
。

实验室分离的鸡软骨采用胶原酶-联合消化制备而来
，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

质量检测

实验室分离的鸡软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1、HBV、HCV
、支原体、细菌、酵母和真菌等
。

培养基：含FBS

、生长添加剂
、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率：每3-4天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：梭形、多角形

传代特性
：可传3代左右

消化液：0.25%

培养条件：气相
：空气，95%；CO2

，5%

鸡软骨体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养
，以此保证该细胞的佳培养状态
。

取材→分离→培养和维持

1


、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来

。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散

，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法

。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液

，接种培养后

，细胞容易贴壁生长。

大鼠白介素1受体样1(IL1RL1)检测试剂盒 ，英文名
： IL1RL1 ELISA Kit

Mouse L-phenylalanine (LPA) ELISA Kit 小鼠苯(LPA)检测试剂盒

ELISA 小鼠白介素-4(mouse IL-4)  进口分装

CLIAKitforIL-6(RabbitIerleukin6)ELISAKit兔白介素6

通用型鸡病毒性关节呼肠孤病毒(Reovirus;REO)试剂盒20次

ELISAKitPI大鼠胰岛素原

ENPP2重组食蟹猴 Autotaxin / ENPP2 蛋白 Protein

HSP-60( Heat shock protein-60 0.5mgHSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60(抗原)

PLTP重组人 PLTP 蛋白 Protein

EIF5 Protein Human 重组人 EIF-5A / EIF5 蛋白 (GST 标签)

IFNGR1 Protein Mouse 重组小鼠 IFNGR1 / CD119 蛋白

HSP-60( Heat shock protein-60 0.5mgHSP-60( Heat shock protein-60) 热休克蛋白-60(抗原)

EIF5 Protein Human 重组人 EIF-5A / EIF5 蛋白 (GST 标签)

ENPP2重组食蟹猴 Autotaxin / ENPP2 蛋白 Protein

IFNGR1 Protein Mouse 重组小鼠 IFNGR1 / CD119 蛋白

PLTP重组人 PLTP 蛋白 Protein

小鼠降钙素受体(C)ELISA 试剂盒 96T/48T

Three iodothyronine (T3) ELISA Kit 人三甲状腺原(T3)检测试剂盒

HumanmembraneIgM,mIgMELISAKit 人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseB检测试剂盒人抗DNA酶B抗体(ai-DNaseB)检测试剂盒规格：96T/48T

植物基因组DNA化试剂盒(高多糖/酚)50次

Humanαmannosidase，αManaseELISAKit人β甘露糖苷酶(βManase)检测试剂盒规格
：96T/48T

鸡软骨细胞小鼠促胰液素   英文名称：   Mouse Secretin   规格：      英文缩写
：   SCT

小鼠分泌型IgA   英文名称：   Mouse secretory Immunoglobulin A   规格
：      英文缩写：   sIgA

小鼠抗小核糖核蛋白/SM抗体   英文名称
：   Mouse Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide/Sm   规格：      英文缩写：   sNP/SM

小鼠超氧化物歧化酶   英文名称：   Mouse Superoxide Dismase   规格：      英文缩写
：   SOD

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用