老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中
，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：鸡骨骼肌细胞

英文名称

：Chicken Skeletal Muscle Cells

组织来源：骨骼肌组织

产品规格
：5×105cells/T25细胞培养瓶

鸡骨骼肌分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌

，肌肉中的一种，约占全身重量的40%
。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附
。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢

。每块肌肉都是具有一定形态
、结构和功能的器官
，有丰富的血管
、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动
。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌
、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方
。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）
。明带染色较浅，而暗带染色较深
。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹
，核很多
，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行
，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形

、不规则形
、三角形或扇形

，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状
；密度高时
，则排列为旋涡状或栅栏状
。传代后细胞生长较快
，4-6天即可汇合
，并保持上述形态学特征和生长特点。

公司实验室分离的鸡骨骼肌采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来
，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的鸡骨骼肌经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料
，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状
，此时再采用机械法

，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后
，细胞容易贴壁生长

。

大鼠层粘连蛋白(Laminin)检测试剂盒 ，英文名： Laminin ELISA Kit

Mouse macrophage derived chemokine (MDC/CCL22) ELISA Kit 小鼠巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)检测试剂盒

Mousethioredoxieductase,xRELISAKit 小鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanox-LDLELISAKit人氧化低密度脂蛋白

同位素核酸(PCR产物)蛋白结合DNA酶足迹法分析试剂盒10次

ELISAKitLFA-3/CD58大鼠淋巴细胞功能相关抗原3

ENG重组人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (Fc 标签) Protein

去唾液酸糖蛋白受体1(ASGPR1)重组蛋白 Recombinant Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1)

STMN1重组人 STMN1 / Stathmin 1 蛋白 Protein

EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

去唾液酸糖蛋白受体1(ASGPR1)重组蛋白 Recombinant Asialoglycoprotein Receptor 1 (ASGR1)

EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白

ENG重组人 Endoglin / CD105 / ENG 蛋白 (Fc 标签) Protein

NA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/Hubei/2011) 神经酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

STMN1重组人 STMN1 / Stathmin 1 蛋白 Protein

小鼠角化细胞内分泌因子(KAF)/双调蛋白(AR)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat perinuclear ai neuophil cytoplasmic aibody (pANCA) ELISA Kit 大鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)检测试剂盒

Humanfilameoushemagglinin,FHAELISAKit 人丝狀血球凝集素(FHA)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAb检测试剂盒人抗染色体抗体(ai-chromosomeAb)检测试剂盒规格：96T/48T

植物活性内质网分离试剂盒10次

Humanα2macroglobulin,α2MGELISAKit人α2巨球蛋白(α2-MG)检测试剂盒规格
：96T/48T

鸡骨骼肌细胞小鼠酯转移蛋白(CETP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名称   方法   规格

小鼠促黄体激素(LH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠血管紧张素原(aGT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗
，非药用，非食用