老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁

，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系

、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：大鼠子宫平滑肌细胞

英文名称：Rat Uterine Smooth Muscle Cells

组织来源：子宫组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

大鼠子宫平滑肌分离自子宫组织
；子宫是孕育胎儿的器官
，位于盆腔中部
，膀胱与直肠之间，其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈

、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持，这些结构受损或松弛时，可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚，由成束或成片的平滑肌组成，肌束间以结缔组织分隔

。子宫平滑肌具有收缩功能

，收缩受激素的调节，其收缩活动有助于向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出
。子宫平滑肌层含有大量的血管，如果平滑肌层细胞过度生长，势必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后


，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一
，呈梭形、不规则形

、三角形或扇形，核卵圆形

、居中；2周后细胞汇合
，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富
，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状
；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快
，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能：①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态
，在孕期能大化的扩张子宫容积，保证胎儿孕育环境；②平滑肌细胞有收缩舒张能力，在生产时能形成生理性的缩腹环，推动胎儿向下移动
，辅助生产
。

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定
，纯度可达90%以上
，且不含有HIV-1
、HBV
、HCV、支原体
、细菌
、酵母和真菌等
。

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气

，95%；CO2，5%

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来
。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密

，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松
，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散

，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

兔白介素-18(rabbit IL-18)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔免疫球蛋白G(rabbit IgG)   作用
：   ELISA   规格：      进口分装

兔免疫球蛋白M(rabbit IgM)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

兔免疫球蛋白E(rabbit IgE)   作用：   ELISA   规格：      进口分装

小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)试剂盒

HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人苯诺龙/苯去(NP)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanconcanavalinA,ConA试剂盒人刀A(ConA)试剂盒规格：96T/48T

组织CDK5/P25激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗体(PR3Ab)试剂盒规格
：96T/48T

GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

Thiosester-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThiosester-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein

ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)

HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白

Thiosester-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThiosester-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)

ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)

GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein

HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白

IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein

大鼠子宫平滑肌细胞大鼠原激活蛋白激酶14(MAPK14)试剂盒 ，英文名
： MAPK14 ELISA Kit

Mouse advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒

Ratadiponectin,ADPELISAKit 大鼠脂联素(ADP)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHHCII(umanheparincofactorII)ELISAKit人肝素辅因子Ⅱ

细胞S6KINASE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitCⅠCP大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用
，非食用